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Contenu archivé le 2022-12-23

The role of peroxiredoxin V in antioxidant defence, apoptosis and regulation of transcription

Objectif

Mammalian peroxiredoxin V (PrxV) is a member of a large family of antioxidant proteins playing important roles in antioxidant defence, tumour suppression and signal transduction. However, precise functions of PrxV are not yet firmly established. This protein is expressed at high level in most of human tissues and is associated with peroxisomes, mitochondria and the nucleus. In this project the role of PrxV in mitochondrial functions, apoptotic signal transduction, DNA antioxidant defence and regulation of transcription will be investigated using specially engineered human cell lines with siRNA-mediated downregulation of PrxV or with impairment of its antioxidant activity (Objective 1, task 1). These lines are already constructed in our team using PrxV siRNA expressing plasmid and in vitro mutagenesis. Next we plan to analyse the correlation between PrxV function and NAD kinase level, PARP-1 activity, and the release of several mitochondrial proteins, essential for activation of cell death machinery (Objective 1, task 2).

Since nuclear PrxV partially co-localizes with Cajal bodies, it can affect pre-assembly of transcription complexes and induce changes of global transcription of DNA repeats, which will be studied here by real-time PCR. Using "phylogenetic footprinting" as well as other standard approaches, essential regulatory elements in the PrxV gene promoter will be identified (Objective 1, task 3), which will help to understand regulation of this gene and its integration into the cellular signalling network of antioxidant responses (Objective 2, task 4). PrxV-interacting soluble proteins in nuclear and mitochondrial extracts will be also investigated using immunoprecipitation and mass-spectrometry techniques (Objective 5, task 5). Approaches used in this project will include traditional methods of molecular biology, cell biology and genomics, as well as modern methods of bioinformatics, real-time PCR, mass-spectrometry and cell death research.

Experiments will be mainly performed by the NIS participating team 3 in St. Petersburg (headed by N. Tomilin), but advanced mitochondrial and apoptosis assays and mass-spectrometry will be performed in the laboratory of the coordinator of this project in Stockholm (Team 1, B. Zhivotovsky) and in the second participating INTAS laboratory in Bergen (team 2, M. Ziegler).

Expected results of this project:
1) elucidation of the mechanism of antiapoptotic activity of PrxV and its potential role in regulation of global gene expression and transcription of non-coding DNA (retrotransposons, tandem repeats);
2) identification of signalling pathways controlling PrxV gene expression, which will allow to decrease PrxV anti-apoptotic activity, increase efficiency of cancer chemotherapy with DNA damaging agents and may be helpful in identification of agents which can decrease ROS production by mitochondria.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

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Mots‑clés

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Programme(s)

Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.

Thème(s)

Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.

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Appel à propositions

Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.

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Régime de financement

Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.

Données non disponibles

Coordinateur

KAROLINSKA INSTITUTE
Contribution de l’UE
Aucune donnée
Adresse
NOBELS VÄGEN, 16
STOCKHOLM
Suède

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Coût total

Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.

Aucune donnée

Participants (2)

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