Un traitement curatif à base de cellules pour l’hémophilie A
Les personnes atteintes d’hémophilie A ont une déficience en facteur de coagulation du sang VIII (FVIII), ce qui entraîne une augmentation du saignement. Parfois dangereux, des dommages aux articulations peuvent également survenir lorsque les hémorragies ne sont pas traitées. HemAcure entendait mettre au point un nouveau traitement qui implique le remplacement du facteur de coagulation du sang manquant par la thérapie génique. Pour ce faire, il est essentiel de démontrer la performance du produit et de développer un processus de fabrication conformément aux normes des bonnes pratiques de fabrication (BPF). «Nous avions deux objectifs principaux», soulignent le Dr Joris Braspenning, coordinateur de la recherche, et la Dre Anne von Thun, agent de liaison de l’UE à l’hôpital universitaire de Wurtzbourg, coordinateur du projet – «fournir des données précliniques démontrant le bien-fondé de la conception pour un traitement curatif cellulaire et génique contre l’hémophilie A, et développer un processus de fabrication conforme aux BPF». Cell Pouch™: des facteurs de coagulation fonctionnels produits Des cellules endothéliales circulantes (BOEC) saines produisent normalement des facteurs de coagulation FVIII. Pour les patients atteints d’hémophilie A, le long chemin complexe vers la production d’un facteur de coagulation entièrement opérationnel commence par l’isolation de ces cellules sanguines. Le gène requis est ensuite inséré pour produire le facteur de coagulation manquant ou non fonctionnel. Comme le souligne le Dr Braspenning, «les cellules sont ensuite expansées dans un bioréacteur à échelle variable. Sans cela, nous n’aurions pas le nombre de cellules requis pour atteindre les niveaux thérapeutiques pertinents de FVIII». Les cellules expansées ont ensuite été transplantées dans un nouveau dispositif, le Cell Pouch™, développé par l’entreprise des sciences de la vie Sernova. «Alors que cette poche se connecte au système sanguin du patient, elle libère en continu des FVIII entièrement fonctionnels pour la coagulation du sang», explique-t-il. La sécurité et la qualité assurées L’ensemble de la procédure a été testé conformément aux règlements BPF actuels afin de garantir que le médicament de thérapie innovante respecte les exigences des autorités européennes. Après l’expansion à large échelle, les chercheurs ont analysé les cellules pour s’assurer de leur sécurité dans plusieurs essais cellulaires. Les cellules génétiquement corrigées ont également été testées en ce qui concerne leur efficacité en matière de production de FVIII. En recourant au modèle murin d’hémophilie A, les niveaux de FVIII des BOEC transplantées ont été mesurés dans le système sanguin des souris durant plusieurs semaines. Les données d’immunofluorescence ont confirmé que le tissu de la poche avait des vaisseaux sanguins. Obstacles surmontés et défis relevés La production d’un nombre suffisant de cellules pour les tests requis comportait plusieurs défis techniques. Le bioréacteur Cell Culture System dispose d’«anneaux» spéciaux pour la culture des cellules qui adhèrent à la zone de croissance. Les cellules endothéliales comme les BOEC nécessitent une matrice pour s’y développer, en général, le collagène. Sans ce revêtement, les cellules ne croissent souvent que lentement ou cessent même de se développer. Bien que ces conditions puissent être identifiées pour permettre aux cellules de s’attacher et d’initier leur croissance, les cellules expansées ne pourraient pas être détachées efficacement des anneaux revêtus par la matrice. Cela entrave l’application du bioréacteur pour l’expansion cellulaire à grande échelle. «La solution consistait à produire suffisamment de cellules pour réaliser nos études, nous avons donc ensuite appliqué les techniques de culture cellulaire manuelles standard», explique le Dr Braspenning. L’avenir pour la thérapie génique et la thérapie régénérative Les membres du consortium envisagent de solliciter un financement national et européen supplémentaire pour compléter les données nécessaires en matière de sécurité et d’efficacité précliniques. L’objectif est d’entreprendre des essais cliniques humains dans de futurs projets connexes. Sernova développe la technologie Cell Pouch™ en vue d’une commercialisation avec de cellules thérapeutiques dans de nombreuses indications. En étendant la portée de la plateforme Cell Pouch™, le dispositif pourrait être utilisé pour traiter d’autres maladies où les facteurs protéiques font défaut, comme le diabète et les maladies thyroïdiennes.
Mots‑clés
HemAcure, facteur de coagulation, gène, hémophilie, facteur VIII (FVIII), Cell Pouch™, cellules endothéliales circulantes (BOEC)