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Quantitative analysis of endosomal escape and intracellular delivery via bioorthogonal luminescent reaction

Description du projet

Quantifier l’administration intracellulaire et l’échappement endosomal des produits biothérapeutiques

L’administration intracellulaire de biomacromolécules imperméables aux membranes est cruciale pour réaliser des progrès dans les sciences de la vie, couvrant la recherche et les applications biomédicales. Le projet BioLure, financé par le CER, mettra au point une méthode permettant de mesurer quantitativement l’administration intracellulaire et l’échappement endosomal à l’aide d’une réaction luminescente bio-orthogonale dans des cellules vivantes. Contrairement aux approches conventionnelles qui utilisent de grands fluorophores, ce projet recourt à un seul acide aminé pour marquer la molécule d’intérêt (MOI pour «molecule of interest»), minimisant ainsi les altérations de ses propriétés. Cette étiquette génère un substrat de luciférase dans le cytoplasme en cas de translocation réussie, facilitée par des réactions bio-orthogonales sélectives. Le projet se concentrera sur l’administration de protéines par rupture de membrane, validera les résultats avec des méthodes complémentaires, et évaluera l’échappement endosomal pour différentes MOI, y compris les ARNsi thérapeutiques.

Objectif

Intracellular delivery of membrane-impermeable biomacromolecules is essential for a broad spectrum of life sciences, ranging from fundamental biological studies to applied biomedical and pharmaceutical sciences. Despite the great efforts in developing new intracellular delivery nanocarriers in the recent 20 years, simple, high-throughput, and accurate intracellular delivery quantification in live cells is still technically challenging. In BioLure, I propose an unconventional approach to quantify intracellular delivery and endosomal escape by a bioorthogonal luminescent reaction in live cells. Instead of a bulky fluorophore, I will label the molecule of interest (MOI) to be delivered with a single amino acid tag, which causes minimal changes in MOIs physicochemical properties and functions. The tag will generate luciferase substrate inside live cells upon successful translocation into the cytoplasm by bioorthogonal reactions with chemoselectivity, rapid kinetics, biocompatibility, and high efficiency. The quantification strategy will initially be applied to the intracellular delivery of proteins via physical membrane disruption and validated by complementary methods. It will then be expanded to nanocarrier-mediated endosomal escape with different MOIs, including therapeutic siRNAs. The successful endosomal escape quantification will allow further nanoparticle screening for siRNA delivery.

I envision that BioLure will lead to a paradigm shift in the intracellular delivery field, facilitating the transformation from qualitative routine fluorescence imaging to high-throughput real-time quantification. The high sensitivity and low background make it an appealing tool for biologists to study endosomal escape and for material scientists to develop potent next-generation non-viral intracellular nanocarriers. Eventually, it will facilitate the design and screening of endosomal escape carriers and future nanomedicine formulations.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: Le vocabulaire scientifique européen.

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Mots‑clés

Les mots-clés du projet tels qu’indiqués par le coordinateur du projet. À ne pas confondre avec la taxonomie EuroSciVoc (champ scientifique).

Programme(s)

Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.

Thème(s)

Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.

Régime de financement

Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.

HORIZON-ERC - HORIZON ERC Grants

Voir tous les projets financés dans le cadre de ce programme de financement

Appel à propositions

Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.

(s’ouvre dans une nouvelle fenêtre) ERC-2023-STG

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Institution d’accueil

HELSINGIN YLIOPISTO
Contribution nette de l'UE

La contribution financière nette de l’UE est la somme d’argent que le participant reçoit, déduite de la contribution de l’UE versée à son tiers lié. Elle prend en compte la répartition de la contribution financière de l’UE entre les bénéficiaires directs du projet et d’autres types de participants, tels que les participants tiers.

€ 1 488 074,00
Coût total

Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.

€ 1 488 074,00

Bénéficiaires (1)

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