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Systematic analyses and rational engineering of fast CO2 fixation pathways in living cells

Description du projet

Renforcer l’efficacité de la fixation du CO2

La fixation biologique du CO2 est cruciale pour la production de biomasse et alimentaire, mais la voie dominante du cycle de Calvin pour y parvenir s’avère inefficace, avec des coûts énergétiques élevés et une cinétique enzymatique lente. Le projet FASTFIX, financé par le CER, se propose d’améliorer ce processus en explorant des voies synthétiques de fixation du CO2 plus performantes. L’un des principaux défis réside dans le peu de données cinétiques disponibles relatives aux enzymes concernées, qui peuvent ne pas refléter leurs performances au sein de cellules vivantes. Pour remédier à cela, FASTFIX se propose de développer une nouvelle méthode destinée à quantifier la cinétique enzymatique directement au sein d’une bactérie Escherichia coli manipulée. En établissant un lien entre les taux de croissance et les niveaux d’enzymes, le projet entend analyser et sélectionner systématiquement les voies synthétiques optimales, ouvrant ainsi la voie à une fixation du CO2 économe en énergie et à une amélioration des rendements agricoles.

Objectif

Biological CO2 fixation is the primary process responsible for biomass and food production and a key player in the atmospheric CO2 balance. Almost all biological CO2 fixation is caried out by a single pathway: the Calvin cycle. Despite the dominance of this pathway in nature it seems relatively inefficient due to high energy costs and poor enzyme kinetics. An exciting option to improve this efficiency, is the exploration of potentially more efficient synthetic CO2 pathways. However, a key challenge to identify promising synthetic CO2 fixation pathways is the limited availability of kinetic data on relevant enzymes. In addition, kinetic data are usually measured in vitro and hence not always representative for the performance in living cells.
In FASTFIX, I will develop and use a novel method to quantify kinetics of enzymes within living cells. I will do this by making the growth rate of engineered Escherichia coli cells directly dependent on the kinetics and levels of the enzymes of interest. By measuring the growth rates and enzyme levels by absolute quantitative proteomics, the in vivo kinetics of the enzymes can be determined.
This approach will be used to generate a complete overview of the kinetics of enzymes involved in promising synthetic CO2 fixation pathways. This will enable an unprecedented systematic analysis of the kinetics of synthetic CO2 fixation pathways.
Based on this analysis I will select the most promising pathway design. Enabled by the in vivo kinetics data I will then employ a novel forward-engineering method to effectively engineer and demonstrate the performance of the full pathway in E. coli.
The realization of a fast, energy-efficient synthetic CO2 fixation pathway in living cells will be a major milestone. The anticipated results will be promising for efficient CO2-based biotechnological production, and in the longer-term may increase agricultural yields and help to more efficiently mitigate humanity’s CO2 footprint.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

Mots‑clés

Programme(s)

Thème(s)

Régime de financement

HORIZON-ERC - HORIZON ERC Grants

Voir tous les projets financés dans le cadre de ce programme de financement

Appel à propositions

(s’ouvre dans une nouvelle fenêtre) ERC-2024-STG

Voir tous les projets financés au titre de cet appel

Institution d’accueil

WAGENINGEN UNIVERSITY
Contribution nette de l'UE
€ 1 499 980,00
Adresse
DROEVENDAALSESTEEG 4
6708 PB Wageningen
Pays-Bas
Région
Oost-Nederland Gelderland Veluwe
Type d’activité
Higher or Secondary Education Establishments
Liens
Coût total
€ 1 499 980,00

Bénéficiaires (1)