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Structure of paramagnetic integral membrane metalloproteins by MAS-NMR

Description du projet

Nouvelle méthode de caractérisation structurale des protéines membranaires

De nombreuses protéines humaines sont des métalloprotéines et nécessitent la fixation d’un métal ou d’un cofacteur contenant un métal pour fonctionner. Les métalloprotéines jouent un rôle central dans le transport des ions métalliques, l’homéostasie et les réactions d’oxydoréduction. Il est donc nécessaire de comprendre leur structure moléculaire et leur biochimie. Financé par le Conseil européen de la recherche, le projet P-MEM-NMR vise à relever les défis techniques destinés à déterminer la structure et la dynamique des protéines membranaires intégrales. Les chercheurs optimiseront une méthode de résonance magnétique nucléaire en rotation à l’angle magique (MAS-NMR) récemment mise au point pour dévoiler les relations structure-activité dans les métalloenzymes membranaires intégrales. Le projet fournira une méthode largement applicable pour la caractérisation structurale des processus cellulaires vitaux, relevant les défis contemporains des sciences moléculaires et chimiques.

Objectif

Integral membrane metalloproteins are involved in the transport and homeostasis of metal ions, as well as in key redox reactions that have a tremendous impact on many fields within life sciences, environment, energy, and industry.
Most of our understanding of fine details of biochemical processes derives from atomic or molecular structures obtained by diffraction methods on single crystal samples. However, in the case of integral membrane systems, single crystals large enough for X-ray diffraction cannot be easily obtained, and the problem of structure elucidation is largely unsolved.
We have recently pioneered a breakthrough approach using Magic-Angle Spinning Nuclear Magnetic Resonance (MAS-NMR) for the atomic-level characterization of paramagnetic materials and complex biological macromolecules. The proposed project aims to leverage these new advances through a series of new concepts i) to improve the resolution and sensitivity of MAS-NMR from nuclei surrounding a paramagnetic metal ion, such as e.g. cobalt, nickel and iron, and ii) to extend its applicability to large integral membrane proteins in lipid membrane environments. With these methods, we will enable the determination of structure-activity relationships in integral membrane metalloenzymes and transporters, by combining the calculation of global structure and dynamics with measurement of the electronic features of metal ions.
These goals require a leap forward with respect to today’s protocols, and we propose to achieve this through a combination of innovative NMR experiments and isotopic labeling, faster MAS rates and high magnetic fields. As outlined here, the approaches go well beyond the frontier of current research. The project will yield a broadly applicable method for the structural characterization of essential cellular processes and thereby will provide a powerful tool to solve challenges at the forefront of molecular and chemical sciences today.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: https://op.europa.eu/en/web/eu-vocabularies/euroscivoc.

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Régime de financement

ERC-COG - Consolidator Grant

Institution d’accueil

CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE CNRS
Contribution nette de l'UE
€ 2 499 375,00
Coût total
€ 2 499 375,00

Bénéficiaires (1)