Objetivo
Antibody-secreting cells consisting of short-lived proliferating plasmablasts and long-lived quiescent plasma cells are essential for the acute response to infection and long-term protection of the host against pathogens. Only a few regulators (Blimp1, IRF4, XBP1, Aiolos, Ikaros and E-proteins) have been implicated in the transcriptional control of antibody-secreting cells, and their target genes, with the exception of Blimp1 and E-proteins, are still unknown. This proposal aims to systematically identify key players in the development and function of antibody-secreting cells by using the CRISPR/Cas9 and Cre/loxP methods.
For this, we improved existing protocols to extend the duration of in vitro plasmablast differentiation and showed that Rosa26(Cas9/+) B cells infected with Blimp1 or Xbp1 sgRNA-expressing retroviruses recapitulated the Blimp1 and Xbp1 mutant phenotypes in this proof-of-principle experiment. Moreover, Cre retrovirus-mediated deletion of Irf4, Ikaros and Aiolos strongly impaired plasmablast differentiation in this optimized system.
To discover new regulators of plasma cell differentiation, CRISPR/Cas9-based screens will be performed with pooled sgRNA libraries targeting all known upregulated genes in plasmablasts and plasma cells, followed by individual validation of the best hits. Selected top-ranked genes will be analyzed in vivo by conditional mutagenesis with newly generated, plasma cell-specific Cre lines. Regulated target genes of IRF4, Ikaros, Aiolos, XBP1 and the XBP1-regulated transcription factor Bhlha15 will be identified in plasmablasts by ChIP- and RNA-seq analyses. Target genes with potentially interesting functions will be further characterized by CRISPR/Cas9- or Cre/loxP-mediated mutagenesis.
These experiments will provide fundamentally new insight into the molecular mechanisms controlling the development and function of antibody-secreting cells, which are the essential effector cells of humoral immunity.
Palabras clave
Palabras clave del proyecto indicadas por el coordinador del proyecto. No confundir con la taxonomía EuroSciVoc (Ámbito científico).
Palabras clave del proyecto indicadas por el coordinador del proyecto. No confundir con la taxonomía EuroSciVoc (Ámbito científico).
Programa(s)
Programas de financiación plurianuales que definen las prioridades de la UE en materia de investigación e innovación.
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H2020-EU.1.1. - EXCELLENT SCIENCE - European Research Council (ERC)
PROGRAMA PRINCIPAL
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Tema(s)
Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.
Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.
Régimen de financiación
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
ERC-ADG - Advanced Grant
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Convocatoria de propuestas
Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.
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(se abrirá en una nueva ventana) ERC-2016-ADG
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Aportación financiera neta de la UE. Es la suma de dinero que recibe el participante, deducida la aportación de la UE a su tercero vinculado. Considera la distribución de la aportación financiera de la UE entre los beneficiarios directos del proyecto y otros tipos de participantes, como los terceros participantes.
1030 Wien
Austria
Los costes totales en que ha incurrido esta organización para participar en el proyecto, incluidos los costes directos e indirectos. Este importe es un subconjunto del presupuesto total del proyecto.