Objectif
The understanding of the functional consequences of neuronal diversity requires a precise identification of neuronal types to study the modalities of their synaptic communications and of their specific contributions to the function of the brain. To investigate these issues, we propose to express specifically fluorescent and luminescent reporter transgenes in a restricted neuronal subtype in order to identify and monitor these cells selectively among the network.
Interneurons, which regulate locally the function of neuronal networks by synchronising the activities of individual neurons, are characterised by an extreme diversity at the biochemical, functional and morphological levels. The current investigations of neocortical interneurons by Rossier using single cell RT-PCR after patch-clamp in acute slices, show that the expression of the neuropeptide somatostatin (SS) defines a population of interneurons which have common molecular and functional properties but cannot be recognized by their morphology in-vivo. The fact that this population constitutes a major inhibitory level acting on neocortical efferent pyramidal neurons (layer V) is also of great interest in this project.
The aim of the proposal is to divert the strong SS promoter to drive the specific expression of transgene reporters in these interneurons. The reporters are Green Fluorescent Protein (GFP, fluorescent), and Aequorin (luminescent upon increase of intracellular calcium)/ which both have been used extensively by Pozzan. A transgenic rodent line expressing GFP has recently been reported. The SS containing interneurons expressing GFP will be identified in acute slices by their fluorescence. This will greatly facilitate their study in the context of the local network by electrophysiology and molecular techniques such as single cell RT-PCR. If they alternatively express Aequorin, the intracellular calcium changes induced by their activity will result in light emission. The activity of this population, and thus of this specific level of the network will be investigated by monitoring the emitted light. Transgenes have previously been expressed within specific regions of the brain. However, the use of reporters detectable in living cells, enabling to monitor the activity of these cells represents a major technical advance in the study of the functional diversity of the CNS cellular network. This has widespread biological relevance as a basic research tool and ultimately for the development of pharmaceutical agents with greater pharmacological specificity.
Champ scientifique (EuroSciVoc)
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
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Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
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Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Données non disponibles
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
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Coordinateur
75231 PARIS
France
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.