Objetivo
PROTEASE INHIBITORS provide plants with a natural DEFENSE AGAINST INSECT PREDATORS. They complex with insect gut proteases, when they are ingested and thus prevent the breakdown of plant protein. Insects can not survive when their proteases are effectively inhibited, but it was shown recently that they avoid the adverse effects of protease inhibitors with the expression of protease INHIBITOR-INSENSITIVE PROTEASES.
Plant protease inhibitor defense can be made more effective by the transformation of plants with genes encoding protease inhibitors that are specific for the insect enzymes that can not be inhibited by the host plant repertoire. A highly effective cysteine protease inhibitor is the multi-domain inhibitor MULTICYSTATIN FROM POTATO. It has the unique property of spontaneously forming natural protein crystals in the plant cell that are visible by microscope, but its structural properties remain unknown. Its EIGHT NEARLY IDENTICAL REPEATED DOMAINS give it the potential to form large complexes with the insect proteases and increased avidity for the insect cysteine proteases to which it binds. Moreover, its multi-domain structure affords it with better stability against proteolytic breakdown by gut carboxypeptidases. The specificity of this inhibitor in its present form is not suitable, however, to inactivate all cysteine proteases of the Colorado potato beetle - the major insect pest of this crop in Europe - and it is desirable to replace the phytocystatin domains with domains from other sources or to IMPROVE their SPECIFICITY.
Our aim is to elucidate the STRUCTURE of the natural 8-domain multicystatin cysteine protease inhibitor from potato in order to understand how it can inhibit 8 molecules of papain simultaneously and to construct similar multi-domain molecules with domains, which are known to be active against phytocystatin-insensitive Colorado potato beetle proteases. Prior work has demonstrated that specific non-plant type I and III cystatins are capable of effectively blocking the phytocystatin insensitive proteases. PHAGE DISPLAY will be used to generate more specific phytocystatin domains effective against the beetle proteases and also to optimize the links between the non-plant cystatins when multi-domain constructs are made. A domain of a small carboxypeptidase inhibitor -preferably minimized- will be added to the multi-domain constructs in order to control these peptidases as well, which are also essential for the insect and known to present a problem for the stability of cystatins in insect guts. Constructs containing multiple domains of type I and III cystatins, selected specific phytocystatins and carboxypeptidase inhibitors will be expressed in TRANSGENIC POTATO PLANTS during the second final year.
The obtention of a fully functional multi-domain structure, and its efficient expression in plants, is a challenge from the protein and genetic engineering points of view. The practical output of the project will be transgenic potato plants with enhanced resistance against Colorado potato beetle. The involvement of a potato breeder ensures that the economic potential will be exploited in a later phase.
Ámbito científico (EuroSciVoc)
CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural. Véas: El vocabulario científico europeo..
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Programa(s)
Programas de financiación plurianuales que definen las prioridades de la UE en materia de investigación e innovación.
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Tema(s)
Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.
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Convocatoria de propuestas
Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.
Datos no disponibles
Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.
Régimen de financiación
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
Coordinador
6700 AA Wageningen
Países Bajos
Los costes totales en que ha incurrido esta organización para participar en el proyecto, incluidos los costes directos e indirectos. Este importe es un subconjunto del presupuesto total del proyecto.