Objectif
Dorsal closure is a well studied morphogenetic process of Drosophilae embryo genesis during which the lateral epidennis moves dorsally, driven in part by dynamic acting protrusions of a specialised population of epidermal cells, the leading edge (LE) cells. Recently, a molecular map of the epidermal cells has revealed that LE cells are polarised in the plane of the epithelium. This polarisation reflects planar cell polarity (PCP) and genetic studies have suggested an involvement of PCP genes in the organisation and dynamics of the cytoskeleton in the LE cells during dorsal closure. Here I propose to study this involvement, focussing on the requirements and interactions between the PCP genes frizzled, dishevelled, flamingo and strabismus and their products. I shall do this by using studies of intracellular protein localisation to refine the molecular map of these proteins in LE cells and analyse their functional relationships through genetic analysis. I will also probe the molecular basis of interactions between these proteins by studying the contribution of their different domains to the generation of asymmetry and to their likely mutually dependent localisation. Finally, in an attempt to identify new components involved in the PCP process I will analyse complexes contributing to polarisation of LE cells using proteomic approaches.
The combination of these experiments will provide a mechanical explanation for the establishment of polarity in the LE cells during dorsal closure that is likely to be relevant to other situations involving PCP.In addition it should provide insights into how PCP is transformed into acting dynamics. The study of intracellular proteins localisation in LE cells will be achieved by confocal imaging, either on fixed embryos stained with antibodies, or on live embryos expressing fluorescent fusion proteins under the Ga14/UAS.system. The imaging of live embryos will also include time-laps movies of their development. I will use molecular cloning to generate -GFP or -CFP fusion proteins with PCP products, which will be expressed under the control of UAS sites.
Those constructs will be either injected to generate transgenic fly lines or used for transient expression assays in the embryo. A LE cells specific Ga14 driver fly line will also be generated. Finally, proteomic approaches will enable the analysis of complexes contributing to polarisation of LE cells. In addition, the overall project will involve classical genetic techniques. This project will allow me to learn and get familiar with the confocal imaging, transient expression assays and proteomic techniques while I will use my experience in genetic, generation of transgenic lines and molecular cloning. It will allow me to introduce the proteomic techniques, available at the University of Cambridge, in the laboratory.
Champ scientifique (EuroSciVoc)
CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: Le vocabulaire scientifique européen.
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- sciences naturelles sciences biologiques biochimie biomolécule protéines
- sciences naturelles sciences biologiques biologie cellulaire polarité cellulaire
- sciences médicales et de la santé médecine clinique ophtalmologie strabisme
- sciences naturelles sciences physiques optique microscopie microscopie confocale
- sciences médicales et de la santé médecine clinique embryologie
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
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Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
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Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
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Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Coordinateur
CB2 3EH Cambridge
Royaume-Uni
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.