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Building a Protein Sequence Library using Nanopores

Objectif

Nanopore is a breakthrough genomic sequencing tool with long read length, high accuracy, and high throughput in reading DNA. However, it is the proteome that ultimately determines the cells phenotype, and tremendous efforts have been made to develop sequencing techniques for reading proteins in the past decade. First breakthroughs have been appearing for sequencing short peptides at the single-molecule level. Current strategies are however still far from sequencing full-length native proteins due to the low synthesis efficiencies in protein handling and the limited scanning length (can only read short peptides with ~25 amino acids). Here, I will first develop a novel method to synthesize a large variety of proteins that are connected to DNA with their own codon sequences, using just a few reactions with a puromycin linker labeled to a mRNA, and followed by in vitro translation, reverse transcription, and RNase cleavage. Furthermore, I propose a single-molecule protein nanopore engineering strategy that significantly extends the MspA nanopore lumen length to push the limit for protein reading length. With the proven abilities of a Hel308 DNA helicase, the engineered nanopore can read the entire DNA codons first, followed by the read of >100 amino acids of the protein. Upon recording large data sets, I will build a protein signal library with the related codon information for the training of a machine learning model, which serves as a tool for de novo protein sequencing. This work has great potential to push the limits of sequencing technology to reading the whole proteome.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: Le vocabulaire scientifique européen.

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Mots‑clés

Les mots-clés du projet tels qu’indiqués par le coordinateur du projet. À ne pas confondre avec la taxonomie EuroSciVoc (champ scientifique).

Programme(s)

Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.

Thème(s)

Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.

Régime de financement

Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.

HORIZON-TMA-MSCA-PF-EF - HORIZON TMA MSCA Postdoctoral Fellowships - European Fellowships

Voir tous les projets financés dans le cadre de ce programme de financement

Appel à propositions

Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.

(s’ouvre dans une nouvelle fenêtre) HORIZON-MSCA-2023-PF-01

Voir tous les projets financés au titre de cet appel

Coordinateur

TECHNISCHE UNIVERSITEIT DELFT
Contribution nette de l'UE

La contribution financière nette de l’UE est la somme d’argent que le participant reçoit, déduite de la contribution de l’UE versée à son tiers lié. Elle prend en compte la répartition de la contribution financière de l’UE entre les bénéficiaires directs du projet et d’autres types de participants, tels que les participants tiers.

€ 203 464,32
Coût total

Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.

Aucune donnée
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