Descripción del proyecto
Búsqueda de los factores que controlan el aprisionamiento de shigela en las jaulas de septina
El patógeno bacteriano «Shigella» provoca disentería bacilar (shigellosis) y también sirve como un importante organismo modelo de laboratorio utilizado en el estudio de la respuesta del hospedador frente a la infección. Las septinas son proteínas de unión a trifosfato de guanosina (GTP) que se encuentran en todas las células eucariotas, excepto en las plantas. Estudios recientes en humanos han descubierto que las septinas crean jaulas alrededor de la bacteria patógena, inmovilizándola y evitando que pueda invadir a otras células. El objetivo del proyecto CAGECONTROL, financiado con fondos europeos, es descubrir los factores que subyacen al atrapamiento de «Shigella» en jaulas de septina. Los investigadores identificarán y estudiarán nuevos factores del hospedador y de la bacteria que subyacen a la formación de jaulas de septina en células HeLa. Los resultados del proyecto podrían traducirse en aplicaciones sanitarias que inspirarían nuevos tratamientos contra la shigellosis.
Objetivo
Shigella is a Gram-negative bacterial pathogen and causative agent of bacillary dysentery (also called shigellosis). Shigella kills ∼164 thousand people per year and is recognised by the WHO as a priority pathogen due to the emergence of antibiotic resistant strains. In the laboratory, Shigella is an important model organism used to study cellular microbiology and host response to infection.
This proposal will innovate approaches to discover factors underlying the entrapment of Shigella in “septin cages”, a host defence mechanism discovered by Prof. Mostowy. Septins are highly conserved GTP-binding proteins that polymerize into cage-like structures to entrap actively dividing intracellular Shigella, preventing their division and actin-based motility. Here, I will identify and study new host and bacterial factors underlying the formation of septin cages in HeLa cells. For this, I will use a proximity biotinylation assay (split APEX2) specifically localized at sites of Shigella-septin association, followed by mass spectrometry. I will then investigate the identified candidates by siRNA and CRISPR/Cas9 depletion in the case of the host, and by homologous recombination in the case of the bacteria, to monitor the number, morphology and dynamics of septin cages using high-content microscopy. In addition, I will do GFP-fusions to analyse the subcellular localisation of the candidates by high-resolution microscopy. Finally, to control the fate of intracellular Shigella, I will manipulate septin cage formation using nanobodies to artificially deliver septins (and other septin caging factors identified by mass spectrometry) to the surface of Shigella during infection.
It is expected that my research will discover fundamental mechanisms underlying the entrapment of Shigella in septin cages, and illuminate issues central to both cell and infection biology. Moreover, my project may translate to human health impact, inspiring new treatments against shigellosis.
Ámbito científico (EuroSciVoc)
CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural.
CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural.
- ciencias naturalesciencias biológicasmicrobiologíabacteriología
- ciencias naturalesciencias biológicasbioquímicabiomoléculasproteínas
- ciencias naturalesciencias físicasópticamicroscopía
- ciencias naturalesciencias químicasquímica analíticaespectrometría de masas
- ciencias médicas y de la saludmedicina básicafarmacología y farmaciafarmacorresistenciaresistencia a antibióticos
Para utilizar esta función, debe iniciar sesión o registrarse
Palabras clave
Programa(s)
Régimen de financiación
MSCA-IF - Marie Skłodowska-Curie Individual Fellowships (IF)Coordinador
WC1E 7HT London
Reino Unido