Objetivo
Virus-encoded movement proteins (MP) are essential for cell-to-cell translocation of plant viral genomes. It is widely believed that intra- and intercellular trafficking of viral MP and transport RNP non-virion (MP-RNA) or virion (CP-RNA) complexes depend on their interactions with cellular receptors, the MP-binding proteins (MPBPs). A collaboration of SCRI, MSU and HU teams in frame of INTAS project (Reference number: INTAS-96-1683) resulted in identification and isolation of TMV MP binding proteins, which may mediate and regulate TMV MP and/or MP-RNA complexes intra- and intercellular transport. It was found that three tobacco leaf cell wall (CW)-associated proteins (34K, 42K and 50-55K) specifically bind TMV MP. The 34K protein was isolated by MP affinity chromatography (MPAC), microsequenced and identified as pectin methylesterase (PME), a ubiquitous plant enzyme involved in CW growth and regeneration. Presumably PME localized in plant intercellular connections, the plasmodesmata (PD), plays a role of the MP receptor. The full-length gene of PME was cloned and expressed in E. coli and antibodies to PME were obtained. These procedures will be applied to the isolation of other MPBPs from plant cells and their characterization.
Furthermore, because pathogens usually adapt the host cell pathways for their life cycle, MP-MPBP interactions most likely reflect a more general and fundamental biological phenomenon, intercellular communication and trafficking of macromolecules within and between plant cells. Presently, however, very little is known about the cellular MPBPs and their interactions with viral MPs and transport RNP complexes during macromolecular transport.
The proposed interdisciplinary research will start filling this gap by identifying and characterizing the architecture and structure of such complexes by atomic force microscopy (AFM) and Biacore system, and elucidating the changes in the structure of complexes following phosphorylation in relation to their functions.
These include:
Complexes formed by the MPs and host-plant-coded MPBPs.
Purified MPBPs, in particular, the pectin methylesterase (PME);
Complexes formed by MPBPs and "MP-RNA" ribonucleoproteins (RNPs);
Nontranslatable non-virion "MP-RNA" or virion "CP-RNA" RNP-complexes, and the same RNPs converted into a translatable form after phosphorylation of the MP (or CP);
Native and phosphorylated viral genome-linked protein (VPg) exposed on the surface of the potato virus A. A putative complex formed by the virion VPg with cellular proteins.
Comparison of architecture and structure of biomolecular complexes with different types of movement will shed more light on the mechanisms of movement and explain functional differencies between different viral MPs. Structure-function analysis of biomolecular transport complexes will provide both novel information on molecular mechanisms of movement of macromolecules and tools for further studies.
The present project is aimed at joining the efforts of the four teams (SCRI, MSU, HU, CB) specialized in virology, molecular biology and genetic engineering with the abilities of the ATC team highly experienced in AFM, for further investigation of structural and biological properties of macromolecular transport complexes.
Ámbito científico (EuroSciVoc)
CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural. Véas: El vocabulario científico europeo..
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Programa(s)
Programas de financiación plurianuales que definen las prioridades de la UE en materia de investigación e innovación.
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Tema(s)
Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.
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Convocatoria de propuestas
Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.
Datos no disponibles
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Régimen de financiación
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
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Datos no disponibles
Coordinador
DD2 5DA Dundee
Reino Unido
Los costes totales en que ha incurrido esta organización para participar en el proyecto, incluidos los costes directos e indirectos. Este importe es un subconjunto del presupuesto total del proyecto.