Objectif
The secretory nuclease from S. Marcesens is a unique endonuclease inasmuch as it cleaves both DNA and RNA in single stranded as well as in double stranded form with very high specific activity. As a secreted enzyme it is very stable, both with respect to thermal and chemical denaturation. It is an enzyme of considerable commercial interest as it can be effectively used to remove nucleic acids from pharmaceutical preparations, in particular from recombinant sources.
This project will study in detail the enzymology of this enzyme, which includes a characterisation of the active site of this enzyme by a mutational analysis and the description of the mechanism of cleavage. It will also investigate whether this enzyme can be immobilised on solid support, which would be interesting for two reasons: an immobilised nuclease could be very elegantly used to remove nucleic acids from recombinant protein preparations; and an immobilised nuclease when integrated in a biosensor could be used to detect minute amounts of nucleic acids as every phosphodiester bond cleaved liberates a proton.
It is likely that efficient immobilisation of the nuclease will require the introduction of additional reactive groups in parts of the protein that are not essential for the structure and function of the nuclease. To identify such parts and to substitute therein one or a few amino acid residues for lysine residues by site directed mutagenesis will be done in parallel to the mutational analysis of the active site of the enzyme.
The project therefore can be divided into four parts: production of nuclease mutants; characterisation of the various nuclease mutants in physico-chemical and biochemical terms; immobilisation of suitable mutants on solid support; and determination of the activity of the immobilised nuclease.
Champ scientifique (EuroSciVoc)
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
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Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Données non disponibles
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Données non disponibles
Coordinateur
35392 Gießen
Allemagne
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.