Objectif
To develop a biotechnological process for the production of large amounts of monochloroacetate (MCA) dehalogenase for use in the detoxification of wastes that arise as a result of MCA manufacture and use.
MCA wastes include residual herbicide that remains in the emptied container after use, the washings from spraying equipment used to apply the compound and waste waters contaminated at point of manufacture. The enzyme will be immobilized for the most cost effective treatment of dilute aqueous waste.
A range of bacteria capable of growth on 50 mM MCA as sole carbon and energy source will be isolated.
To identify the most suitable enzyme for the process, a selection of the bacteria will be grown on MCA liquid media and cell free extracts prepared by ultrasonication. The dehalogenase activity will be assayed by measuring chloride ion release by means of a chloride ion electrode attached to a millivolt meter. The dehalogenase enzyme in the various crude extracts will be assessed for the properties related to operational use. The dehalogenase which best meets the desired requirements will be selected and a biotechnological procedure developed for production of large amounts of the enzyme. For this the gene encoding the enzyme will be cloned and its over expression engineered.
To purify the dehalogenase enzyme using fast protein liquid chromatography (FPLC) procedures such that the amino terminal amino acid sequence can be obtained using an automatic gas phase protein sequencer. A synthetic oligonucleotide corresponding to an appropriate region of the sequence will then be synthesized on an automatic deoxyribonucleic acid(DNA) synthesizer. The oligonucleotide, terminally labelled with phosphorous-32, will be used in colony hybridizations to identify the complementary DNA. Once a clone has been obtained the dehalogenase gene will be localized by restriction mapping and subcloning. The nucleotide sequence of the gene will be determined to provide information that will permit polymerise chain reaction methodology to be used in the direct linking of the dehalogenase gene to the tac promoter.
The culture conditions, in terms of type of medium and extent of cell growth, will be investigated to identify conditions for optimal production of the enzyme from the cloned gene.
Champ scientifique (EuroSciVoc)
CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: Le vocabulaire scientifique européen.
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- sciences naturelles sciences biologiques microbiologie bactériologie
- sciences naturelles sciences biologiques génétique ADN
- sciences naturelles sciences biologiques génétique nucléotide
- sciences naturelles sciences chimiques chimie organique amines
- sciences naturelles sciences biologiques biochimie biomolécule protéines enzyme
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
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Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Données non disponibles
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Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Données non disponibles
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Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Coordinateur
MADRID
Espagne
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.