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Mechanism of action of anti-fungals against mycotoxigenic species: from molecular to phenotypic efficacy

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Factores implicados en la producción de micotoxinas

Cada año las toxinas micóticas (micotoxinas) contaminan alrededor del 25 % de los cultivos alimentarios y su consumo produce enfermedades agudas y crónicas tanto en animales como en humanos. Los conservantes alimentarios, tanto naturales como sintéticos, inhiben la formación de moho (un hongo), pero el papel del entorno en su capacidad de inhibición se conoce poco.

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El equipo del proyecto ANTIFUNGALVSMYCOTOX, financiado con fondos europeos, estudió la eficacia de diversas concentraciones de sorbato de potasio, butilhidroxianisol (BHA), pimaricina y tebuconazol para evitar la aparición de moho en distintas condiciones ambientales. Se evaluaron los efectos de estos antifúngicos aptos para uso alimentario en diferentes fases de crecimiento de hongos productores de micotoxinas clave como Fusarium y Aspergillus. Los miembros del proyecto utilizaron técnicas punteras como reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (RT-PCR), micromatrices de micotoxinas, microscopía confocal y citometría de flujo para mediciones y fenotipado de toxinas. Los datos obtenidos se integraron mediante métodos bioinformáticos como la proyección sobre estructuras latentes (PLS), el análisis de componentes principales y las redes neuronales. Los investigadores diseñaron un sistema Bioscreen C novedoso para el análisis turbidimétrico automatizado de mohos filamentosos a fin de estudiar el comportamiento del hongo expuesto a antifúngicos. Se determinaron las dosis letales 50 y 90 % (DL50 y DL90, respectivamente) para estos compuestos con objeto de investigar los efectos de diferentes concentraciones de fármaco. Con esta técnica se extrajeron y cuantificaron también las micotoxinas y el micelio del hongo con el objetivo final de llevar a cabo experimentos de expresión génica. Los científicos lograron diseñar una técnica destinada al análisis de la producción de tricoticenos tipo A en medios con avena. Se desarrolló un sistema de centrífuga junto con una técnica de purificación semiautomática para lograr la extracción y la purificación rápidas del ARN fúngico. Los resultados de los estudios in vitro e in vivo revelaron que algunas concentraciones de fármaco podían estimular el crecimiento del hongo en lugar de inhibir la producción de micotoxinas. Se analizaron las respuestas de las esporas de Aspergillus flavus ante determinados antifúngicos bajo diversas condiciones ambientales y únicamente resultó eficaz el BHA a concentraciones elevadas. Se está modificando el modelo de crecimiento mixto para evaluar el efecto de otros factores ambientales sobre la producción de micotoxinas y el crecimiento de hongos. Los interesantes resultados de ANTIFUNGALVSMYCOTOX permitieron adquirir un conocimiento sin precedentes de la respuesta fúngica ante diversos fármacos y bajo distintas concentraciones y condiciones ambientales. Estos impresionantes hallazgos han sido publicados en diversas revistas con revisores externos.

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