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Lipase immobilization for microscopic investigation of enzyme activity

Descripción del proyecto

Maximizar la tasa biocatalítica de una lipasa prometedora

Las aguas residuales oleosas procedentes de actividades industriales y humanas son una amenaza importante para la calidad de las aguas subterráneas y del agua potable. Los biocatalizadores, como la lipasa de «Thermomyces lanuginosus» (TLL, por sus siglas en inglés), pueden eliminar lípidos con eficacia, pero su solubilidad y reutilización son limitadas, lo que aumenta los costes y limita su aplicación generalizada. Con el apoyo de las Acciones Marie Skłodowska-Curie, el equipo del proyecto lipaseTEM inmovilizará la TLL en soportes sólidos e investigará la interacción de la enzima inmovilizada con la nanoestructura del soporte y el sustrato lipídico con estudios cinéticos «in situ». Mediante métodos de inmovilización diversos y nanoestructuras de soporte, el equipo intentará encontrar las características del sistema que maximicen la velocidad de reacción biocatalítica.

Objetivo

Water contamination caused by human and industrial activities is a significant global concern. One of the most prominent pollutants is oily wastewater, severely impacting groundwater and drinking water quality. Biocatalysts, such as Thermomyces lanuginosus lipase (TLL), are used in many household detergents to remove lipids effectively. However, their limited solubility and reusability can increase running costs and hinder large-scale applications. To address this issue, we plan to immobilize TLL on solid supports and determine the appropriate surface density of enzymes, conformational changes during immobilization, and the effect of support on its kinetic properties. Our goal is to develop innovative methods for nanoscale imaging of enzymes using transmission electron microscopy (TEM) to gain insights into the structural aspects of immobilization. By investigating the interaction of the immobilized enzyme with the support nanostructure and the lipid substrate, we expect to identify the attributes that maximize the biocatalytic reaction rate. We will explore different immobilization methods on various nanostructures and investigate how TLL interacts with the immobilization matrices at the nanoscale level. Additionally, we will apply water vapor atmosphere in the TEM to explore in situ the dynamic switching between the active and idle state of the single enzyme molecules in real-time by their conformational changes. We are aiming to obtain groundbreaking results and a paradigm shift, based on the in situ kinetic studies of lipase-catalyzed chemical reactions which can become a gateway into the quantum mechanical world of molecular science.

Ámbito científico (EuroSciVoc)

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Coordinador

DANMARKS TEKNISKE UNIVERSITET
Aportación neta de la UEn
€ 230 774,40
Dirección
ANKER ENGELUNDS VEJ 101
2800 Kongens Lyngby
Dinamarca

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Región
Danmark Hovedstaden Københavns omegn
Tipo de actividad
Higher or Secondary Education Establishments
Enlaces
Coste total
Sin datos