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Repurposing the CRISPR-associated transposons (CAST) system for gene editing applications

Description du projet

Des outils avancés d’édition du génome

Le CRISPR-Cas, découvert à l’origine comme un système immunitaire bactérien, est un outil d’édition de gènes très efficace pour les modifications ciblées de l’ADN. Le système modifie une séquence génomique en créant des cassures double brin dans l’ADN, puis en tirant parti des voies de réparation de l’ADN cellulaire. Ce procédé limite toutefois son application aux cellules en division. Soutenu par le programme Actions Marie Skłodowska-Curie, le projet CASTedit propose de réutiliser les transposons associés à CRISPR (CAST) à des fins d’édition de gènes. Les CAST sont des éléments génétiques mobiles programmables qui insèrent de grandes cargaisons d’ADN à l’aide d’un mécanisme guidé par l’ARN, sans qu’il soit nécessaire de procéder à des cassures double brin. Les chercheurs recourront à des technologies de pointe pour concevoir et valider les CAST dans des cellules de mammifères, ce qui ouvrira de nouvelles frontières en médecine régénérative, en ingénierie cellulaire et en thérapie génique.

Objectif

The rapid advancements in CRISPR-Cas technology have revolutionized gene editing, yet significant challenges persist, particularly the reliance on DNA Damage Response (DDR) pathways and the limitations in integrating large DNA segments. These constraints hinder the application of CRISPR-Cas systems, especially in non-dividing cells and complex genomic modifications. The recently discovered CRISPR-associated transposon (CAST) systems offer a transformative solution, enabling the insertion of large DNA cargos (10–30 kb) into specific genomic locations without inducing double-strand breaks (DSBs), thereby providing a safer and more versatile genome-editing tool. The CASTedit project aims to repurpose CAST systems as next-generation genome editing tools, with a focus on mammalian cells. Specific objectives include the development of engineered CAST systems (Types V-K and I-D) for precise DNA integration, the exploration of novel CAST complexes for RNA-guided transposition, and their validation at the organismal level. Successful implementation of these systems in eukaryotic cells could overcome current CRISPR limitations, paving the way for innovative applications in cell engineering, regenerative medicine, and biotechnology. Under the guidance of Prof. Guillermo Montoya, a leading expert in the structure-function analysis of nucleases, and with his pioneering research in CAST complex assembly at the University of Copenhagen, I will be well-positioned to achieve the goals of this project. I will leverage my expertise in CRISPR-based genome editing, protein expression systems in eukaryotes, and high-throughput mutant screening to optimize CAST systems for precise DNA integration in mammalian cells. The successful execution of CASTedit will establish me as a prominent researcher in genome engineering, utilizing the host institution’s state-of-the-art facilities and collaborative environment to drive innovation in therapeutic applications.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

Mots‑clés

Programme(s)

Thème(s)

Régime de financement

HORIZON-TMA-MSCA-PF-EF - HORIZON TMA MSCA Postdoctoral Fellowships - European Fellowships

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Appel à propositions

(s’ouvre dans une nouvelle fenêtre) HORIZON-MSCA-2024-PF-01

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Coordinateur

KOBENHAVNS UNIVERSITET
Contribution nette de l'UE
€ 247 553,28
Coût total
Aucune donnée