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Repurposing the CRISPR-associated transposons (CAST) system for gene editing applications

Descrizione del progetto

Strumenti avanzati di editing del genoma

CRISPR-Cas, scoperto originariamente come sistema immunitario batterico, è uno strumento di editing genico estremamente efficace per eseguire modifiche mirate del DNA. Questo sistema modifica una sequenza genomica creando rotture a doppio filamento nel DNA e sfruttando poi le vie di riparazione del DNA cellulare. Tuttavia, questo ne limita l’applicazione alle cellule in divisione. Con il sostegno del programma di azioni Marie Skłodowska-Curie, il progetto CASTedit propone di riutilizzare i trasposoni associati a CRISPR (CAST) per scopi di editing genico. I CAST sono elementi genetici mobili programmabili che inseriscono grandi carichi di DNA usando un meccanismo guidato dall’RNA senza la necessità di rompere il doppio filamento. Il gruppo di ricerca impiegherà tecnologie all’avanguardia per progettare e convalidare i CAST in cellule di mammifero, aprendo nuove frontiere nella medicina rigenerativa, nell’ingegneria cellulare e nella terapia genica.

Obiettivo

The rapid advancements in CRISPR-Cas technology have revolutionized gene editing, yet significant challenges persist, particularly the reliance on DNA Damage Response (DDR) pathways and the limitations in integrating large DNA segments. These constraints hinder the application of CRISPR-Cas systems, especially in non-dividing cells and complex genomic modifications. The recently discovered CRISPR-associated transposon (CAST) systems offer a transformative solution, enabling the insertion of large DNA cargos (10–30 kb) into specific genomic locations without inducing double-strand breaks (DSBs), thereby providing a safer and more versatile genome-editing tool. The CASTedit project aims to repurpose CAST systems as next-generation genome editing tools, with a focus on mammalian cells. Specific objectives include the development of engineered CAST systems (Types V-K and I-D) for precise DNA integration, the exploration of novel CAST complexes for RNA-guided transposition, and their validation at the organismal level. Successful implementation of these systems in eukaryotic cells could overcome current CRISPR limitations, paving the way for innovative applications in cell engineering, regenerative medicine, and biotechnology. Under the guidance of Prof. Guillermo Montoya, a leading expert in the structure-function analysis of nucleases, and with his pioneering research in CAST complex assembly at the University of Copenhagen, I will be well-positioned to achieve the goals of this project. I will leverage my expertise in CRISPR-based genome editing, protein expression systems in eukaryotes, and high-throughput mutant screening to optimize CAST systems for precise DNA integration in mammalian cells. The successful execution of CASTedit will establish me as a prominent researcher in genome engineering, utilizing the host institution’s state-of-the-art facilities and collaborative environment to drive innovation in therapeutic applications.

Campo scientifico (EuroSciVoc)

Parole chiave

Programma(i)

Argomento(i)

Meccanismo di finanziamento

HORIZON-TMA-MSCA-PF-EF - HORIZON TMA MSCA Postdoctoral Fellowships - European Fellowships

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Invito a presentare proposte

(si apre in una nuova finestra) HORIZON-MSCA-2024-PF-01

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Coordinatore

KOBENHAVNS UNIVERSITET
Contributo netto dell'UE
€ 247 553,28
Indirizzo
NORREGADE 10
1165 KOBENHAVN
Danimarca
Regione
Danmark Hovedstaden Byen København
Tipo di attività
Higher or Secondary Education Establishments
Collegamenti
Costo totale
Nessun dato