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Real-time mapping of protein proton dynamics through photoresponsive non-canonical amino acids and ultrafast spectroscopy

Projektbeschreibung

Dynamische Kartierung des Protein-Protonentransfers

Der Protonentransfer in Proteinen, bei dem sich ein positives Wasserstoffion (Proton) entlang eines Weges bewegt, treibt die Zellenergetik, die enzymatische Katalyse, die Signaltransduktion und weitere biologische Funktionen an. Der dynamische Transferprozess und die dabei durchlaufenen Wege sind zum größten Teil unbekannt. Die Arbeit des innerhalb der Marie-Skłodowska-Curie-Maßnahmen unterstützten Projekts TrackingProtons zielt darauf ab, den Protonentransfer in Echtzeit zu überwachen. Unter Nutzung lichtempfindlicher nichtkanonischer Aminosäuren, d. h. natürlicher oder synthetischer Aminosäuren, die nicht zu den zwanzig genetisch kodierten zählen, wird eine lichtempfindliche Donor-Aminosäure und ein Protonenakzeptor in dasselbe Proteingerüst eingebaut. Optische Anregung wird die treibende Kraft für den Protonentransfer auslösen, der mithilfe komplementärer ultraschneller Fluoreszenz- und Infrarotspektroskopie nachverfolgt wird.

Ziel

Proton transfer (PT) underpins a wide range of protein functions in biology, including bioenergetics, enzymatic catalysis, pH regulation, protein stability, membrane transport, and signal transduction. Despite its central role, directly mapping PT pathways inside proteins remains a major challenge, as current methods typically capture only the end products of PT rather than the transfer process itself. TrackingProtons seeks to overcome this limitation by establishing a new strategy to initiate and monitor PT in real time using genetically encoded, light-sensitive non-canonical amino acids (ncAAs). These ncAAs act as photoacids and photobases that undergo large, reversible pKa shifts upon optical excitation, creating a strong driving force for PT between defined sites within proteins. The project will develop an orthogonal genetic code expansion system to enable site-specific dual incorporation of a proton donor and acceptor into the same protein scaffold. Carbonic anhydrase, a prototypical PT enzyme, will serve as the model system, with PT dynamics tracked using complementary ultrafast fluorescence and infrared spectroscopy. This approach will provide the first direct observation of PT trajectories with molecular precision, offering transformative insights into proton-coupled processes across biology. Beyond advancing fundamental understanding, the project will establish expertise at the interface of protein engineering and ultrafast spectroscopy, supporting the applicant’s progression toward scientific independence.

Wissenschaftliches Gebiet (EuroSciVoc)

Schlüsselbegriffe

Programm/Programme

Thema/Themen

Finanzierungsplan

HORIZON-TMA-MSCA-PF-EF - HORIZON TMA MSCA Postdoctoral Fellowships - European Fellowships

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Aufforderung zur Vorschlagseinreichung

(öffnet in neuem Fenster) HORIZON-MSCA-2025-PF

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Koordinator

THE UNIVERSITY OF SHEFFIELD
Netto-EU-Beitrag
€ 276 187,92
Adresse
FIRTH COURT WESTERN BANK
S10 2TN SHEFFIELD
Vereinigtes Königreich
Region
Yorkshire and the Humber South Yorkshire Sheffield
Aktivitätstyp
Higher or Secondary Education Establishments
Links
Gesamtkosten
Keine Daten