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Contenu archivé le 2024-05-29

In vitro reconstitution of TTSS-mediated export across the bacterial inner membrane of Shigella flexneri

Objectif

Shigella flexneri, a Gram-negative enterobacterium, causes dysentery in humans. It uses a type III secretion system (TTSS) to infect its host. The TTSS is a large protein complex that spans both bacterial membranes and the host plasma membrane. It mediates the apparent direct translocation of proteins from the bacterium through its central channel into the host cell. Therefore, unravelling the molecular mechanisms by which the TTSS functions is key to understanding how it mediates this host-pathogen interac tion. For this purpose, we aim to reconstitute in vitro its sole energy-dependent step, i.e. protein export across the bacterial inner membrane (IM). In vitro reconstitution allows us to study features of the protein export reaction that would otherwise no t be accessible, e. g. analysing the separate steps that encompasses the passage of the substrate through the IM channel.First we will analyse the in vivo properties of protein export by the IM domain, using a Shigella strain that lacks the periplasmic/ou ter membrane region of the TTSS. In this strain, the export of MxiHCdelta5, a non-polymerising mutant of the needle protein MxiH, will be analysed. Then, the components of the IM domain of the TTSS will be overproduced and inner membrane vesicles (IMVs) ha rbouring the overproduced IM domain will be isolated. Protein export assays will be conducted in vitro by the addition of the cytoplasmic TTSS components and the substrate MxiHCdelta5. These results will be compared to the data acquired in the in vivo expo rt assay. These experiments will greatly enhance our understanding of TTSS function. Many elements of TTSSs are evolutionary conserved, in particular the IM domain, thus our work should also help understand how the TTSSs in bacteria such as Chlamydia, Salm onella and Pseudomonas species, all important human, animal and/or plant pathogens, interact with the cells of their host. This should aid in the design of a new range of broad-spectrum antimicrobials.

Champ scientifique (EuroSciVoc)

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Mots‑clés

Les mots-clés du projet tels qu’indiqués par le coordinateur du projet. À ne pas confondre avec la taxonomie EuroSciVoc (champ scientifique).

Thème(s)

Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.

Appel à propositions

Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.

FP6-2004-MOBILITY-5
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Régime de financement

Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.

SCF - Marie Curie actions-Series of events

Coordinateur

THE CHANCELLOR, MASTERS AND SCHOLARS OF THE UNIVERSITY OF OXFORD
Contribution de l’UE
Aucune donnée
Coût total

Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.

Aucune donnée
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