Objetivo
The structural and functional characterisation of 10-15 lipases is under investigation. The aim of the project is to acquire so much new knowledge about a sufficient number of these enzymes that it will be possible to understand why they are lipases and how they function as such.
The project focussed on the purification, X-ray structure elucidation, protein engineering and mechanistic investigation of various fungal and bacterial lipases. These included lipases of Geotrichum candidum, Candida cylindracea, Rhizopus, Pseudomonas, Penicillium, Chromobacterium and a thermophilic lipase of Bacillus stearothermophilus. Purification protocols are available for most lipases under study. Diffracting crystals were obtained for 4, needle form crystals obtained for 2 lipases and 1 lipase structure was obtained by modelling. Two lipases have been cloned. The stereoselectivity, towards prochiral trigylcerides, of 24 purified lipases has been investigated. Most of the lipases showed stereopreference for the sn-1 position and hydrolysis of the sn-2 bond was catalyzed by few lipases.
The project aims at the structure of microbial lipases, of different substrate specificity, using X-ray analysis. This will allow formulation of the catalytic mechanism and specificity when combined with protein chemistry and site-directed mutagenesis.4 classes of lipase (specific towards unsaturated fatty acids, 1,3-regio-specific, non-specific, thermophilic) are proposed. Three distinctly different Geotrichum lipases will be investigated: Unilever 'Geotrichum B' - which has a unique specificity for d9-unsaturated fatty acids, Unilever 'Geotrichum A' - which has little specificity for this substrate, and Geotrichum candidum ATCC 34614 (
'Geotrichum C'), which has moderate specificity. The lipase from Rhizopus arrhizus, Candida cylindracea ATCC 14830
and pseudomonas spec. ATCC 21808 will serve as examples for 1,3-regio-specific, non-specific and non-specific thermostable lipases. The proposed lipases have, to different extents, been purified, crystallized or cloned by members of the project group.The project now aims at a concerted effort to establish the following results, in the framework of the targets defined above:
a) purification to homogeneity of the enzymes in at least 100 mg quantities,
b crystallization, and heavy metal substitution,
c) cloning, expression, secretion and sequencing in E.coli and subsequently in Aspergillus or Saccharomyces,
d) determination of detailed kinetic,
e) chemical modification followed by protein sequencing, and
f) site directed mutagenesis/computer modelling ('Protein Engineering').
Ámbito científico (EuroSciVoc)
CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural. Véas: El vocabulario científico europeo..
CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural. Véas: El vocabulario científico europeo..
- ciencias naturales ciencias biológicas bioquímica biomoléculas lípidos
- ciencias naturales ciencias biológicas bioquímica biomoléculas proteínas enzima
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Programa(s)
Programas de financiación plurianuales que definen las prioridades de la UE en materia de investigación e innovación.
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Tema(s)
Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.
Datos no disponibles
Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.
Convocatoria de propuestas
Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.
Datos no disponibles
Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.
Régimen de financiación
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.
Coordinador
38124 Braunschweig
Alemania
Los costes totales en que ha incurrido esta organización para participar en el proyecto, incluidos los costes directos e indirectos. Este importe es un subconjunto del presupuesto total del proyecto.