Obiettivo
The structural and functional characterisation of 10-15 lipases is under investigation. The aim of the project is to acquire so much new knowledge about a sufficient number of these enzymes that it will be possible to understand why they are lipases and how they function as such.
The project focussed on the purification, X-ray structure elucidation, protein engineering and mechanistic investigation of various fungal and bacterial lipases. These included lipases of Geotrichum candidum, Candida cylindracea, Rhizopus, Pseudomonas, Penicillium, Chromobacterium and a thermophilic lipase of Bacillus stearothermophilus. Purification protocols are available for most lipases under study. Diffracting crystals were obtained for 4, needle form crystals obtained for 2 lipases and 1 lipase structure was obtained by modelling. Two lipases have been cloned. The stereoselectivity, towards prochiral trigylcerides, of 24 purified lipases has been investigated. Most of the lipases showed stereopreference for the sn-1 position and hydrolysis of the sn-2 bond was catalyzed by few lipases.
The project aims at the structure of microbial lipases, of different substrate specificity, using X-ray analysis. This will allow formulation of the catalytic mechanism and specificity when combined with protein chemistry and site-directed mutagenesis.4 classes of lipase (specific towards unsaturated fatty acids, 1,3-regio-specific, non-specific, thermophilic) are proposed. Three distinctly different Geotrichum lipases will be investigated: Unilever 'Geotrichum B' - which has a unique specificity for d9-unsaturated fatty acids, Unilever 'Geotrichum A' - which has little specificity for this substrate, and Geotrichum candidum ATCC 34614 (
'Geotrichum C'), which has moderate specificity. The lipase from Rhizopus arrhizus, Candida cylindracea ATCC 14830
and pseudomonas spec. ATCC 21808 will serve as examples for 1,3-regio-specific, non-specific and non-specific thermostable lipases. The proposed lipases have, to different extents, been purified, crystallized or cloned by members of the project group.The project now aims at a concerted effort to establish the following results, in the framework of the targets defined above:
a) purification to homogeneity of the enzymes in at least 100 mg quantities,
b crystallization, and heavy metal substitution,
c) cloning, expression, secretion and sequencing in E.coli and subsequently in Aspergillus or Saccharomyces,
d) determination of detailed kinetic,
e) chemical modification followed by protein sequencing, and
f) site directed mutagenesis/computer modelling ('Protein Engineering').
Campo scientifico (EuroSciVoc)
CORDIS classifica i progetti con EuroSciVoc, una tassonomia multilingue dei campi scientifici, attraverso un processo semi-automatico basato su tecniche NLP. Cfr.: Il Vocabolario Scientifico Europeo.
CORDIS classifica i progetti con EuroSciVoc, una tassonomia multilingue dei campi scientifici, attraverso un processo semi-automatico basato su tecniche NLP. Cfr.: Il Vocabolario Scientifico Europeo.
- scienze naturali scienze biologiche biochimica biomolecole lipidi
- scienze naturali scienze biologiche biochimica biomolecole proteine enzimi
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Programma(i)
Programmi di finanziamento pluriennali che definiscono le priorità dell’UE in materia di ricerca e innovazione.
Programmi di finanziamento pluriennali che definiscono le priorità dell’UE in materia di ricerca e innovazione.
Argomento(i)
Gli inviti a presentare proposte sono suddivisi per argomenti. Un argomento definisce un’area o un tema specifico per il quale i candidati possono presentare proposte. La descrizione di un argomento comprende il suo ambito specifico e l’impatto previsto del progetto finanziato.
Dati non disponibili
Gli inviti a presentare proposte sono suddivisi per argomenti. Un argomento definisce un’area o un tema specifico per il quale i candidati possono presentare proposte. La descrizione di un argomento comprende il suo ambito specifico e l’impatto previsto del progetto finanziato.
Invito a presentare proposte
Procedura per invitare i candidati a presentare proposte di progetti, con l’obiettivo di ricevere finanziamenti dall’UE.
Dati non disponibili
Procedura per invitare i candidati a presentare proposte di progetti, con l’obiettivo di ricevere finanziamenti dall’UE.
Meccanismo di finanziamento
Meccanismo di finanziamento (o «Tipo di azione») all’interno di un programma con caratteristiche comuni. Specifica: l’ambito di ciò che viene finanziato; il tasso di rimborso; i criteri di valutazione specifici per qualificarsi per il finanziamento; l’uso di forme semplificate di costi come gli importi forfettari.
Meccanismo di finanziamento (o «Tipo di azione») all’interno di un programma con caratteristiche comuni. Specifica: l’ambito di ciò che viene finanziato; il tasso di rimborso; i criteri di valutazione specifici per qualificarsi per il finanziamento; l’uso di forme semplificate di costi come gli importi forfettari.
Coordinatore
38124 Braunschweig
Germania
I costi totali sostenuti dall’organizzazione per partecipare al progetto, compresi i costi diretti e indiretti. Questo importo è un sottoinsieme del bilancio complessivo del progetto.