Objectif
The structural and functional characterisation of 10-15 lipases is under investigation. The aim of the project is to acquire so much new knowledge about a sufficient number of these enzymes that it will be possible to understand why they are lipases and how they function as such.
The project focussed on the purification, X-ray structure elucidation, protein engineering and mechanistic investigation of various fungal and bacterial lipases. These included lipases of Geotrichum candidum, Candida cylindracea, Rhizopus, Pseudomonas, Penicillium, Chromobacterium and a thermophilic lipase of Bacillus stearothermophilus. Purification protocols are available for most lipases under study. Diffracting crystals were obtained for 4, needle form crystals obtained for 2 lipases and 1 lipase structure was obtained by modelling. Two lipases have been cloned. The stereoselectivity, towards prochiral trigylcerides, of 24 purified lipases has been investigated. Most of the lipases showed stereopreference for the sn-1 position and hydrolysis of the sn-2 bond was catalyzed by few lipases.
The project aims at the structure of microbial lipases, of different substrate specificity, using X-ray analysis. This will allow formulation of the catalytic mechanism and specificity when combined with protein chemistry and site-directed mutagenesis.4 classes of lipase (specific towards unsaturated fatty acids, 1,3-regio-specific, non-specific, thermophilic) are proposed. Three distinctly different Geotrichum lipases will be investigated: Unilever 'Geotrichum B' - which has a unique specificity for d9-unsaturated fatty acids, Unilever 'Geotrichum A' - which has little specificity for this substrate, and Geotrichum candidum ATCC 34614 (
'Geotrichum C'), which has moderate specificity. The lipase from Rhizopus arrhizus, Candida cylindracea ATCC 14830
and pseudomonas spec. ATCC 21808 will serve as examples for 1,3-regio-specific, non-specific and non-specific thermostable lipases. The proposed lipases have, to different extents, been purified, crystallized or cloned by members of the project group.The project now aims at a concerted effort to establish the following results, in the framework of the targets defined above:
a) purification to homogeneity of the enzymes in at least 100 mg quantities,
b crystallization, and heavy metal substitution,
c) cloning, expression, secretion and sequencing in E.coli and subsequently in Aspergillus or Saccharomyces,
d) determination of detailed kinetic,
e) chemical modification followed by protein sequencing, and
f) site directed mutagenesis/computer modelling ('Protein Engineering').
Champ scientifique (EuroSciVoc)
CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: Le vocabulaire scientifique européen.
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- sciences naturelles sciences biologiques biochimie biomolécule lipides
- sciences naturelles sciences biologiques biochimie biomolécule protéines enzyme
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Données non disponibles
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Données non disponibles
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Coordinateur
38124 Braunschweig
Allemagne
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.