La reestructuración del cromosoma durante la mitosis
Las células eucariotas poseen cromosomas largos y lineares que se ubican en su núcleo. Durante la interfase, cuando la célula no se está dividiendo, el ADN se encuentra en su estado menos condensado y puede verse distribuida de forma homogénea y laxa por el núcleo. Durante la división celular, los cromosomas tienen que formar dichos cuerpos compactos con forma de barra, de modo que una copia del genoma pueda trasladarse a cada célula hija naciente. El proyecto financiado por una beca Marie Curie «Assembly and function of the chromosome periphery during mitosis» (CHROMOSOME PERIPHERY) se puso en marcha para describir los mecanismos moleculares implicados en la reorganización cromosómica dependiente del ciclo celular. Sus responsables científicos establecieron un esquema detallado de las proteínas involucradas en el eje y la periferia cromosómica de las células humanas. La ubicación de una proteína del eje cromosómico, la topoisomerasa II alfa, se determinó en células HeLa en proceso de división (mitóticas) y no sincronizadas aplicando un método bioquímico (inmunoprecipitación de cromatina y después secuenciación), lo cual permitió identificar en el ADN unos cuatro mil puntos de unión. Este método podría aplicarse también a las proteínas periféricas del cromosoma. Para obtener un análisis óptico de ocho proteínas periféricas del cromosoma en células mitóticas se empleó microscopía confocal tridimensional de células vivas en un estudio que generó un mapa espacial y temporal del ensamblaje de la periferia cromosómica. Además, los investigadores desarrollaron métodos de cribado para determinar la relevancia funcional de los componentes periféricos del cromosoma durante la mitosis. Ya se han generado las placas de cribado por transfección en estado sólido y los primeros experimentos piloto apuntan a la viabilidad del cribado. El proyecto logró generar datos que aclaran la contribución de los dominios periférico y axial del cromosoma a la conformación cromosómica mitótica.
Palabras clave
Cromosomas, división celular, topoisomerasa II alfa, ChIP-Seq, proteínas periféricas del cromosoma, morfogénesis mitótica, placas de cribado por transfección
