La base molecular del mantenimiento de la integridad genómica
Los daños en el ADN son la principal causa de inestabilidad genómica y una de las posibles causas de carcinogenia. Los daños en el ADN en forma de roturas de la doble hebra (RDH) pueden ser resultado bien del estrés medioambiental o de procesos metabólicos endógenos del ADN. En circunstancias normales, las lesiones del ADN se reparan por medio de procesos enzimáticos complejos que se ven, no obstante, obstaculizados por la accesibilidad del ADN. El propósito del proyecto financiado con fondos europeos INOHR (Chromatin remodeling in DNA repair: The role of the INO80 complex) era investigar la actividad de remodelación de la cromatina en el complejo INO80 humano, que se ha especulado que podría desempeñar algún papel en la reparación basada en recombinación homóloga de las RDH. Al margen de la reparación del ADN, el complejo INO80 es importante para la regulación de la expresión génica y la replicación del ADN, y está conservado evolutivamente. El INO80 humano es un complejo de gran tamaño, consistente en veinte subunidades esenciales y reguladoras, pero aún está por determinar su mecanismo de actuación preciso. Uno de los principales logros del proyecto INOHR fue la expresión de seis histonas humanas y la clonación de secuencias de posicionamiento de nucleosomas conducente a matrices de secuencias de distintas longitudes. Mediante la marcación de las histonas con fluoróforos, los científicos consiguieron reconstituir octámeros de histonas fluorescentes, que son la estructura central de los nucleosomas. De manera colectiva, sus esfuerzos permitieron realizar estudios de remodelación de la cromatina en moléculas individuales mediante la observación al microscopio de la función del complejo INO80. En su conjunto, el estudio INOHR ha obtenido complejos macromoleculares sin precedentes para seguir investigando el mecanismo molecular de reparación del ADN. Las herramientas generadas promoverán estudios futuros de la interacción de las proteínas con el ADN a nivel de moléculas individuales. También sirven para estudiar otras enzimas de procesamiento del ADN que juegan un papel esencial en el mantenimiento de la integridad del ADN.
