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Contenuto archiviato il 2024-06-18

Capturing kinase-substrate pairs in intact mammalian cells by using unnatural amino acid mutagenesis and photocrosslinking

Obiettivo

Aim of this project is to develop a method for capturing kinase-substrate pairs in living mammalian cells using unnatural amino acid mutagenesis and affinity crosslinking. Photocrosslinking amino acids (containing benzophenone or azide groups) will be introduced site-specifically into the backbone of target proteins using ad hoc developed orthogonal tRNA/synthetase pairs functional in mammalian cells. By introducing the photocrosslinker at suitable positions into the substrate binding region of a protein kinase, we expect to crosslink its natural substrates in response to cell stimulation and UV irradiation. Likewise, by introducing a photocrosslinker close to the phosphorylation site of a kinase substrate we will aim at capturing it upstream kinase. Once proofed the feasibility of the approach using the PKA/CREB system, we will apply such strategy to identify unknown kinases-substrate pairs involved in signaling pathways regulating fundamental cellular processes (BRCA1 and NF-kappaB pathway). This will represent a new general method for capturing transient protein-protein interactions in vivo by applying a minimal perturbation to the natural system, which will respond to a need of the scientific community, since methods for studying protein-protein interactions available nowadays mostly involve non-native conditions. The use of orthogonal tRNA/synthetase pairs for unnatural amino acid mutagenesis is a very recently developed technique, which is applied in very few laboratories in the world, and which has a tremendous potential for enabling the study of protein structure and function directly in the living cell. In the outgoing phase the fellow intends to learn this technique and explore new possibilities of its application. This knowledge will be applied in the return phase to study a major research target of the return host. The establishment of this technique in European countries will increase the competitiveness of the European research in the biomedical field.

Campo scientifico (EuroSciVoc)

CORDIS classifica i progetti con EuroSciVoc, una tassonomia multilingue dei campi scientifici, attraverso un processo semi-automatico basato su tecniche NLP. Cfr.: Il Vocabolario Scientifico Europeo.

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Argomento(i)

Gli inviti a presentare proposte sono suddivisi per argomenti. Un argomento definisce un’area o un tema specifico per il quale i candidati possono presentare proposte. La descrizione di un argomento comprende il suo ambito specifico e l’impatto previsto del progetto finanziato.

Invito a presentare proposte

Procedura per invitare i candidati a presentare proposte di progetti, con l’obiettivo di ricevere finanziamenti dall’UE.

FP7-PEOPLE-2009-IOF
Vedi altri progetti per questo bando

Meccanismo di finanziamento

Meccanismo di finanziamento (o «Tipo di azione») all’interno di un programma con caratteristiche comuni. Specifica: l’ambito di ciò che viene finanziato; il tasso di rimborso; i criteri di valutazione specifici per qualificarsi per il finanziamento; l’uso di forme semplificate di costi come gli importi forfettari.

MC-IOF - International Outgoing Fellowships (IOF)

Coordinatore

MAX DELBRUECK CENTRUM FUER MOLEKULARE MEDIZIN IN DER HELMHOLTZ-GEMEINSCHAFT (MDC)
Contributo UE
€ 245 939,90
Indirizzo
ROBERT ROSSLE STRASSE 10
13125 Berlin
Germania

Mostra sulla mappa

Regione
Berlin Berlin Berlin
Tipo di attività
Research Organisations
Collegamenti
Costo totale

I costi totali sostenuti dall’organizzazione per partecipare al progetto, compresi i costi diretti e indiretti. Questo importo è un sottoinsieme del bilancio complessivo del progetto.

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