Objectif
The incorporation of unnatural amino acids (more than 50 to date) into proteins in vivo has resulted in the generation of
proteins with novel chemical, biological, and physical properties. However, some unnatural amino acids possess properties,
such as an inability to cross the cell membrane or a level of toxicity dangerous to the organism, that restrict their incorporation
into proteins in vivo. In addition, even when an unnatural amino acid crosses the cell membrane, its transport efficiency
within the cell is very low. We propose to overcome these limitations by exploiting translational components evolved
tRNA-synthetases and their cognate suppressor-tRNA from Archea for the incorporation of an array of unnatural amino acids
into proteins in vitro in a cell-free protein translation system. The expressed recombinant proteins containing the unnatural
amino acids will be purified from the reaction mixture and used for further research. Using the cell free system, first we will
demonstrate our new approach by incorporating novel unnatural amino acids, i.e. thiolysine analogues, into proteins using
the broad substrate specificity of evolved tRNA synthetases. We will then incorporate a thiolysine analogue into PCNA for
the site-specific ubiquitination and SUMOylation of these proteins for in vitro studies of the interactions between PCNA and
interacting proteins and to follow the progress of the replication fork. This unique approach will show for the first time the use
of evolved synthetases in a cell free translation system, with the advantage being that previously un-incorporable unnatural
amino acids can be incorporated using this approach. Our overall aim is to enable the introduction of new functionalities into
proteins.
Champ scientifique (EuroSciVoc)
CORDIS classe les projets avec EuroSciVoc, une taxonomie multilingue des domaines scientifiques, grâce à un processus semi-automatique basé sur des techniques TLN. Voir: Le vocabulaire scientifique européen.
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- sciences naturelles sciences biologiques biochimie biomolécule protéines
- sciences naturelles sciences chimiques chimie organique amines
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
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Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
ERC-2010-StG_20091118
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Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Institution d’accueil
84105 Beer Sheva
Israël
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.