Objectif
Non-pathogenic mycobacteria are efficiently phagocytosed by macrophages and killed within phagosomes by acid hydrolases, reactive nitrogen intermediates, and likely other still unidentified factors that are part of the macrophage pro-inflammatory response. In contrast, pathogenic mycobacteria such as M. tuberculosis survive and grow within phagosomes by blocking macrophage pro-inflammatory responses, including the NF-kB transcription system, phago-lysosome fusion, acidification and nitric oxide release. Activation of NF-kB has recently been shown, by the host group, to be essential for macrophages to kill the non-pathogen M. smegmatis.
Here two genomic screening assays are proposed: the first (A) will use RNA micrroarray chips to identify macrophage mRNA¿s t hat are up-regulated in response to M.smegmatis or M.bovis BCG, that behaves like a pathogen. Emphasis will be given to identify macrophage proteins that are potentially involved in killing M.smegmatis; some of these proteins are predicted to be under the control of the NF-kB system. It is also expected that the potential killing proteins may not be up-regulated in BCG-infected cells, that therefore serve as a control.
The second screen (B) involves a recently developed high throughput RNAi approach that will be used to identify proteins that, when knocked down block the ability of GFP-M.smegmatis to fuse with lysosomes labelled with a red marker (rhodamine gold or lysotracker red). These proteins should be positive regulators of phagosome maturation and their identification should facilitate future efforts to understand how the pathogenic mycobacteria block phagosome maturation.
In parallel, RNAi knockdown of putative macrophage killing factors identified in screen A will allow us to test the hypothesis that these proteins indeed facilitate killing of M.smegmatis. The final proof of killing will be sought by testing purified factors for their effects on M.smegmatis growth and survival in vitro.
Champ scientifique (EuroSciVoc)
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Mots‑clés
Les mots-clés du projet tels qu’indiqués par le coordinateur du projet. À ne pas confondre avec la taxonomie EuroSciVoc (champ scientifique).
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Programme(s)
Programmes de financement pluriannuels qui définissent les priorités de l’UE en matière de recherche et d’innovation.
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Thème(s)
Les appels à propositions sont divisés en thèmes. Un thème définit un sujet ou un domaine spécifique dans le cadre duquel les candidats peuvent soumettre des propositions. La description d’un thème comprend sa portée spécifique et l’impact attendu du projet financé.
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Appel à propositions
Procédure par laquelle les candidats sont invités à soumettre des propositions de projet en vue de bénéficier d’un financement de l’UE.
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FP6-2005-MOBILITY-7
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Régime de financement
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
Régime de financement (ou «type d’action») à l’intérieur d’un programme présentant des caractéristiques communes. Le régime de financement précise le champ d’application de ce qui est financé, le taux de remboursement, les critères d’évaluation spécifiques pour bénéficier du financement et les formes simplifiées de couverture des coûts, telles que les montants forfaitaires.
IIF - Marie Curie actions-Incoming International Fellowships
Coordinateur
HEIDELBERG
Allemagne
Les coûts totaux encourus par l’organisation concernée pour participer au projet, y compris les coûts directs et indirects. Ce montant est un sous-ensemble du budget global du projet.