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CORDIS - Resultados de investigaciones de la UE
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Modification of single guide (sg) RNA in CRISPR-Cas9 gene editing Tool

Descripción del proyecto

Visualización de la edición genética

La modificación precisa del ADN para tratar enfermedades genéticas constituye un objetivo a largo plazo de los científicos de todo el mundo. El sistema CRISPR-Cas es una adaptación de un mecanismo de defensa bacteriano y ofrece la posibilidad de editar con precisión cualquier genoma. Se compone de la nucleasa Cas9 y de una molécula de ARN que se une específicamente a la secuencia objetivo y guía a Cas9 para escindirla. El objetivo del proyecto MsgRNA, financiado con fondos europeos, es aumentar la especificidad del sistema CRISPR-Cas mediante un método de obtención de imágenes basado en la fluorescencia. Además, los científicos trabajan para reducir la degradación de los objetivos no deseados, que es un efecto secundario de los sistemas actuales. Se espera que el trabajo haga avanzar la edición genética y amplíe su funcionalidad y aplicaciones.

Objetivo

CRISPR/Cas9 has been extensively studied for genome editing, but its therapeutic application has been hampered by off-target effects. Site-specific modification of single guide (sg) RNA in CRISPR system is a potential means to expand the utility of CRISPR-Cas genome editing. To address this, and reduce of synthetic burden of sgRNA we propose a ‘click’ ligation method to synthesize sgRNA where two chemically modified oligonucleotides are joined together using CuAAC chemistry. The resultant artificial linkage is biomimetic, so it should not affect Cas9 activity. This method offers significantly higher DNA-targeting specificity (i.e. less off-target effects) and most importantly provides a cost-effective means to access thousands of synthetic sgRNAs. Imaging in CRISPR-Cas9 system using fluorescence in situ hybridisation (FISH) probes have enabled significant advancements in understanding genomic structure and transcriptional control. We will explore novel approaches to image CRISPR-Cas9 system using fluorophore-quencher pairs. The activation of fluorescence can be performed upon nuclear localisation using RNase H, and upon sgRNA binding to the target DNA. These methods will provide highly fluorescent sgRNAs for live-cell imaging, potentially much brighter compared to other methods. To control CRISPR off-target effects we will also design a light induced DNA damage method where cyanovinylcarbazole nucleoside or psolaren will be incorporated in the DNA-targeting RNA. Therefore, modification of sgRNA for CRISPR system can be used to address the biological limitations of CRISPR and expand its functionality. This will open up many avenues for future development and lead to more application-focused studies on therapeutic gene editing.

Ámbito científico (EuroSciVoc)

CORDIS clasifica los proyectos con EuroSciVoc, una taxonomía plurilingüe de ámbitos científicos, mediante un proceso semiautomático basado en técnicas de procesamiento del lenguaje natural. Véas: El vocabulario científico europeo..

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Programa(s)

Programas de financiación plurianuales que definen las prioridades de la UE en materia de investigación e innovación.

Tema(s)

Las convocatorias de propuestas se dividen en temas. Un tema define una materia o área específica para la que los solicitantes pueden presentar propuestas. La descripción de un tema comprende su alcance específico y la repercusión prevista del proyecto financiado.

Régimen de financiación

Régimen de financiación (o «Tipo de acción») dentro de un programa con características comunes. Especifica: el alcance de lo que se financia; el porcentaje de reembolso; los criterios específicos de evaluación para optar a la financiación; y el uso de formas simplificadas de costes como los importes a tanto alzado.

MSCA-IF-EF-ST - Standard EF

Ver todos los proyectos financiados en el marco de este régimen de financiación

Convocatoria de propuestas

Procedimiento para invitar a los solicitantes a presentar propuestas de proyectos con el objetivo de obtener financiación de la UE.

(se abrirá en una nueva ventana) H2020-MSCA-IF-2018

Ver todos los proyectos financiados en el marco de esta convocatoria

Coordinador

THE CHANCELLOR, MASTERS AND SCHOLARS OF THE UNIVERSITY OF OXFORD
Aportación neta de la UEn

Aportación financiera neta de la UE. Es la suma de dinero que recibe el participante, deducida la aportación de la UE a su tercero vinculado. Considera la distribución de la aportación financiera de la UE entre los beneficiarios directos del proyecto y otros tipos de participantes, como los terceros participantes.

€ 212 933,76
Dirección
WELLINGTON SQUARE UNIVERSITY OFFICES
OX1 2JD Oxford
Reino Unido

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Región
South East (England) Berkshire, Buckinghamshire and Oxfordshire Oxfordshire
Tipo de actividad
Higher or Secondary Education Establishments
Enlaces
Coste total

Los costes totales en que ha incurrido esta organización para participar en el proyecto, incluidos los costes directos e indirectos. Este importe es un subconjunto del presupuesto total del proyecto.

€ 212 933,76
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