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Deciphering the role of PI(4,5)P2 and its modulators PPK-1 and CSNK-1 in nematode asymmetric division

Descripción del proyecto

Determinantes clave en la división celular asimétrica

En los primeros momentos del desarrollo, las células experimentan divisiones asimétricas que dan lugar a células hijas con distintos destinos. A pesar de la identificación de los factores específicos que rigen la polaridad celular y la división asimétrica, existen determinados aspectos del proceso que siguen sin conocerse bien. El proyecto PIADINE, financiado con fondos europeos, tiene como objetivo investigar cómo la tensión de la membrana plasmática afecta a la división celular concentrándose en el papel del lípido fosfatidilinositol bifosfato (PIP2). Mediante el uso de embriones de «Caenorhabditis elegans» y «Pristionchus pacificus» como organismos modelo, los investigadores aportarán nueva información sobre los mecanismos de la división celular asimétrica con importantes implicaciones para la biología del desarrollo y de las células madre.

Objetivo

The first embryonic division of Caenorhabditis elegans is a powerful system to dissect the mechanisms governing asymmetric division, which relies on PAR-proteins for cell polarity and on dynein-dependant forces for centrosome and spindle positioning. In contrast to the extensive knowledge regarding proteins regulating asymmetric division, the contribution of plasma membrane tension, as well as of PIP2 and its modulators PPK-1 and CSNK-1 is poorly understood.

I propose to decipher these questions as follows:

1) PIP2 is enriched in the embryo anterior in microdomains of the plasma membrane. I will test the contribution of PPK-1, the only kinase from the proteome converting PIP into PIP2 in formation of PIP2 microdomains distribution, cell polarity and pulling force. This will be achieved through ppk-1(RNAi) as well as two complementary optogenetic approaches to obtain acute spatiotemporal inactivation of PIP2.

2) I will decipher how the casein kinase CSNK-1 interacts with and phosphorylates PPK-1, thereby presumably regulating PIP2 microdomain distribution and function, as well as identify and characterize up to three CSNK-1 phospho-substrates with.

3) I will test whether PIP2 undergoes phase separation driven by a decrease in plasma membrane tension, and, if so, investigate the consequences on asymmetric division. Moreover, I will study the relationship between membrane tension and cortex contractility.

4) I will analyze asymmetric cell division in the one-cell Pristiochus pacificus embryo I will then use the knowledge acquired in C. elegans to conduct related experiments in P. pacificus, thus investigating potential conserved and divergent themes governing asymmetric division across nematode evolution.

Overall, these experiments will shed critical light on the poorly understood contribution of PIP2 and its modulators to asymmetric division, an evolutionarily conserved process fundamental for development and stem cell lineages.

Ámbito científico (EuroSciVoc)

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Palabras clave

Programa(s)

Tema(s)

Régimen de financiación

MSCA-IF - Marie Skłodowska-Curie Individual Fellowships (IF)

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Convocatoria de propuestas

(se abrirá en una nueva ventana) H2020-MSCA-IF-2019

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Coordinador

ECOLE POLYTECHNIQUE FEDERALE DE LAUSANNE
Aportación neta de la UEn
€ 191 149,44
Dirección
BATIMENT CE 3316 STATION 1
1015 Lausanne
Suiza
Región
Schweiz/Suisse/Svizzera Région lémanique Vaud
Tipo de actividad
Higher or Secondary Education Establishments
Enlaces
Coste total
€ 191 149,44