Ziel
Improve the yield of in vitro methodology to produce cattle embryos.
Oocyte competence and maturation (D)
A defined maturation medium (M199) has been used to investigate the effect of various components: single factors such as gonadotropins (FSH, LH) and growth factors (insulin family, EGF) as well as complex mixtures such as serum and follicular fluids from follicles of different sizes and health status. A fully defined maturation medium has been finally proposed (M199 + 10ng/ml EGF) that provides matured oocytes with high developmental potential in a reproducible manner. Calf oocytes have been chosen as a negative model for the study of oocyte developmental competence.
Early embryo development
Our study led to a better understanding of the ways through which oviduct might act in vivo and in vitro. Activin, EGF and TGFalpha were identified and localized in bovine oviduct mucosa. Their relevance to embryonic development was suggested by the presence of EGF/TGFalpha receptors on the bovine embryo from the zygote to the blastocyst (C). Two glycoproteins considered to have a positive role on embryo development (EGP, estrus associated glycoprotein and TIMP, tissue inhibitor of metalloproteinase) were also investigated but do not seem to play an important role on in vitro bovine embryo development (A).
Serum-free conditioned media provided us with an interesting tool for the study of the effect of oviduct and BRL cell produced factors on embryo development.
These media were biologically active: they supported development of the zygote to the blastocyst (15 to 30% blastocysts) stage (A,B). These blastocysts produced calves after transfer (31% born calves) (A, B, D) and could be frozen (20% born calves) (A).
Our study clearly shows that somatic cells play an important active role in sustaining in vitro bovine embryo development both by detoxifying the basal medium and by secreting embryotrophic factors (A,D). These favourable effects do not depend on the stage of the oestrus cycle and do not seem to be oviduct specific (A, B, C, D, E).
These embryotrophic factors were shown to increase blastocyst developmental rate when added to a defined medium (A). They were partially purified and some of their properties were characterised (A, B, E).
The kinetics of development of the embryos in BOECM was related to their further development (A) and active transcription of the embryonic genome started at the 4 cell stage (A).
The bovine homologue of the oct 4 transcription factor gene was identified, cloned, completely sequenced and mapped on chromosome 23 (C). However further analysis indicated that, in bovine, this gene is expressed ubiquitously contrary to the mouse where its expression is restricted to totipotent and multipotent cells.
Finally, it was demonstrated that embryos generated in vitro are also able to produce biologically active trophoblastic vesicles without the requirement of transient exposure to a uterine environment (B, E).
MAJOR SCIENTIFIC BREAKTHROUGHS:
Identification of some factors (EGF) involved in oocyte maturation leading to the formulation of a chemically defined medium; detection of the expression of activin, TGFa and EGF in the oviduct; isolation and sequence of a clone of oct 4 gene; use of time-lapse cinematographic technique as a predictive tool of the embryonic developmental potential; marked improvement of embryo development in a defined medium by the addition of high molecular weight factors (>10 KDa) produced by oviduct cells; in vitro-derived trophoblastic tissue were shown to secrete large amounts of interferon tau and represents an important model for studies on peri-implantation physiology.
Wissenschaftliches Gebiet (EuroSciVoc)
CORDIS klassifiziert Projekte mit EuroSciVoc, einer mehrsprachigen Taxonomie der Wissenschaftsbereiche, durch einen halbautomatischen Prozess, der auf Verfahren der Verarbeitung natürlicher Sprache beruht. Siehe: Das European Science Vocabulary.
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Mehrjährige Finanzierungsprogramme, in denen die Prioritäten der EU für Forschung und Innovation festgelegt sind.
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Aufforderungen zur Einreichung von Vorschlägen sind nach Themen gegliedert. Ein Thema definiert einen bestimmten Bereich oder ein Gebiet, zu dem Vorschläge eingereicht werden können. Die Beschreibung eines Themas umfasst seinen spezifischen Umfang und die erwarteten Auswirkungen des finanzierten Projekts.
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Aufforderung zur Vorschlagseinreichung
Verfahren zur Aufforderung zur Einreichung von Projektvorschlägen mit dem Ziel, eine EU-Finanzierung zu erhalten.
Daten nicht verfügbar
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Finanzierungsplan
Finanzierungsregelung (oder „Art der Maßnahme“) innerhalb eines Programms mit gemeinsamen Merkmalen. Sieht folgendes vor: den Umfang der finanzierten Maßnahmen, den Erstattungssatz, spezifische Bewertungskriterien für die Finanzierung und die Verwendung vereinfachter Kostenformen wie Pauschalbeträge.
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Koordinator
LOUVAIN-LA-NEUVE
Belgien
Die Gesamtkosten, die dieser Organisation durch die Beteiligung am Projekt entstanden sind, einschließlich der direkten und indirekten Kosten. Dieser Betrag ist Teil des Gesamtbudgets des Projekts.