Obiettivo
The following studies have been carried out:
Analysis of the functional geometries of bacteriophage Mu transposase and repressor:
Site directed mutagenesis of the Mu A gene:
Non sense mutations were introduced in vitro by site directed mutagenesis in regions of the transposase gene, A, allowing a more precise mapping of one subdomain of the transposase (residues 426-501) located towards the C-terminal end of the protein and involved in pA binding to the ends of the Mu genome. It was also found to be likely that the tryptophan residue at position 32 was crucial for activity.
Characterization of repressor mutants:
The differences between transposase and repressor affinities for the internal activating sequence (IAS)/operator deoxyribonucleic acid (DNA) segment, were investigated by analysis of the functional geometry of Mu repressor. The N-terminal domain of repressor was not sufficient for operator binding. Mutations in the carboxy terminal domain of Mu repressor suggested a key role for this part of the protein.
Analysis of the N-terminal domains of Mu repressor and transposase:
Repressor and transposase binding to the operator/IAS sequence suggests that, despite their having different affinities for this DNA segment, both proteins have N-terminal domains which could share similar 3-dimensional structures. In order to determine this structure by nuclear magnetic resonance (NMR), peptides were derived from repressor and transposase which would still be active for binding to the operator/IAS sequence.
Oligomerization properties of Mu repressor:
Protein crosslinking experiments where the repressor was incubated at various concentrations with a protein crosslinking reagent and analysed by electrophoresis showed extensive intermolecular crosslinking.
IHF:
IHF and Mu repression;
the himA and himD genes of a phytopathogenic bacterium.
FIS:
role of FIS in the maintenance of bacteriophage Mu lysogeny by the repressor.
Gin-FIS:
analysis of protein protein interactions between Gin molecules during site specific recombination;
the FIS operon and its regulation;
cloning and characterization of E. coli genes regulated by FIS.
The structural and temporal architecture of protein/DNA complexes involved in two relatively well defined recombination reaction (phage Mu transposition ant the gin recombinational switch) will be investigated with particular emphasis on the role of host proteins in these processes. It is proposed to use both in vivo and in vitro approaches in these studies. The host factors include the histone-like proteins HU, IHF, and Fis (for which mutants and cloned genes are available) and an additional as yet unidentified DNA binding protein.
Campo scientifico (EuroSciVoc)
CORDIS classifica i progetti con EuroSciVoc, una tassonomia multilingue dei campi scientifici, attraverso un processo semi-automatico basato su tecniche NLP. Cfr.: Il Vocabolario Scientifico Europeo.
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Programma(i)
Programmi di finanziamento pluriennali che definiscono le priorità dell’UE in materia di ricerca e innovazione.
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Argomento(i)
Gli inviti a presentare proposte sono suddivisi per argomenti. Un argomento definisce un’area o un tema specifico per il quale i candidati possono presentare proposte. La descrizione di un argomento comprende il suo ambito specifico e l’impatto previsto del progetto finanziato.
Dati non disponibili
Gli inviti a presentare proposte sono suddivisi per argomenti. Un argomento definisce un’area o un tema specifico per il quale i candidati possono presentare proposte. La descrizione di un argomento comprende il suo ambito specifico e l’impatto previsto del progetto finanziato.
Invito a presentare proposte
Procedura per invitare i candidati a presentare proposte di progetti, con l’obiettivo di ricevere finanziamenti dall’UE.
Dati non disponibili
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Meccanismo di finanziamento
Meccanismo di finanziamento (o «Tipo di azione») all’interno di un programma con caratteristiche comuni. Specifica: l’ambito di ciò che viene finanziato; il tasso di rimborso; i criteri di valutazione specifici per qualificarsi per il finanziamento; l’uso di forme semplificate di costi come gli importi forfettari.
Meccanismo di finanziamento (o «Tipo di azione») all’interno di un programma con caratteristiche comuni. Specifica: l’ambito di ciò che viene finanziato; il tasso di rimborso; i criteri di valutazione specifici per qualificarsi per il finanziamento; l’uso di forme semplificate di costi come gli importi forfettari.
Coordinatore
BRUXELLES
Belgio
I costi totali sostenuti dall’organizzazione per partecipare al progetto, compresi i costi diretti e indiretti. Questo importo è un sottoinsieme del bilancio complessivo del progetto.