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Induced pluripotent stem cells in rabbit, pig

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Modelos de células madre de mamífero

Las investigaciones de las células madre son muy alentadoras para el tratamiento en el futuro de enfermedades y lesiones graves. Si se mejoran los protocolos de diferenciación de las células madre, será posible disponer de alternativas al uso de animales vivos en pruebas de fármacos, modelos de enfermedades e investigación sobre la medicina regenerativa.

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Las células madre presentan un gran potencial de diferenciación en diferentes tipos celulares en el organismo durante las primeras etapas de la vida y en el crecimiento. Hasta ahora, los científicos han trabajado con dos tipos de células madre: células madre embrionarias y células madre adultas o específicas de tejido no embrionario. Las células madre pluripotentes inducidas (iPSC) son más útiles para la investigación. Se trata de células adultas que han sido reprogramadas genéticamente a un estado de célula madre embrionaria por factores que definen las propiedades de las células madre embrionarias. El proyecto financiado por la Unión Europea «Induced pluripotent stem cells in rabbit, pig» (ANISTEM) organizó un curso de formación en la investigación de células madre. El programa permitirá una colaboración a largo plazo entre participantes del sector industrial y miembros de entidades académicas. Los socios industriales húngaros y las universidades de Países Bajos y Hungría están colaborando en el campo de la investigación de células madre en dos mamíferos (conejo y cerdo). El objetivo de ANISTEM es la generación y caracterización de las iPSC en estos animales y el estudio de su diferenciación en células cardíacas. Los investigadores identificaron y aislaron cinco marcadores de pluripotencialidad de conejo (OCT4, SOX2, KLF4, cMYC y NANOG) y lograron producir dos líneas de iPSC de conejo. Las caracterizaron en función del patrón de expresión del marcador y comprobaron su capacidad de diferenciarse in vitro en las células de las tres capas embrionarias. Las iPSC de cerdo adquiridas han sido cultivadas en diferentes condiciones. Se aisló el ARN de estas células y actualmente se está estudiando la expresión génica de los genes de la pluripotencialidad (OCT4, NANOG, SOX2).Los investigadores también estudiaron a los ovocitos de cerdo, denominados células Cumulus, como fuente de iPSC en modalidad no transgénica. Las cultivaron durante doce días con factores específicos. Se analizaron las células mediante tinción de la actividad de la fosfatasa alcalina y la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcripción inversa (qRT-PCR) para estudiar la expresión de los genes que son marcadores de la pluripotencialidad o de la diferenciación. Los resultados de este proyecto han sido presentados en numerosos encuentros y en doce publicaciones de revistas científicas. La principal repercusión del proyecto es la integración de los esfuerzos en el estudio de la biología de las células madre, los modelos biomédicos y tratamientos celulares realizados por los sectores industrial y académico para desarrollar una colaboración a largo plazo.

Palabras clave

Células madre, células madre de mamífero, pruebas de fármacos, iPSC, marcadores de diferenciación

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