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Development and validation of a microarray based automated diagnostic system for the detection of influenza virus types and subtypes at point-of-care

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Diagnóstico avanzado de la gripe

Un diagnóstico a tiempo de la gripe resulta clave para su tratamiento inmediato. Un consorcio europeo ha trabajado en el desarrollo de una herramienta de diagnóstico innovadora basada en chips.

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En los últimos años se ha desarrollado una serie de herramientas de diagnóstico de la gripe para su uso en centros de asistencia. Estas se basan en la tecnología de usar tiras reactivas en inmunoensayos de flujo lateral sólidos, asequibles y fáciles de realizar. Sin embargo, los análisis rápidos presentan limitaciones, como la falta de sensibilidad, la incapacidad de distinguir entre diferentes cepas de virus gripales y la escasa versatilidad. Se requieren nuevos formatos y técnicas de análisis para determinar varios parámetros simultáneamente. En este contexto, los miembros del proyecto FLUARRAY (Development and validation of a microarray based automated diagnostic system for the detection of influenza virus types and subtypes at point-of-care), financiado con fondos europeos, se propusieron desarrollar un sistema basado en chips para diagnosticar la gripe en centros de asistencia. Esta tecnología aumentaría significativamente el rendimiento de los ensayos al tiempo que reduciría los costes. Actualmente, los ensayos con microchips se procesan manualmente y requieren un equipo que no resulta adecuado para el laboratorio clínico. Los miembros del proyecto FLUARRAY transformaron la sofisticada tecnología de los microchips en un sistema de diagnóstico simple y sólido. Este sistema puede procesar simultáneamente cientos de ensayos en una superficie del tamaño de una uña. Se utilizará para distinguir entre las variantes de hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA) de los principales virus humanos y animales en especímenes biológicos. El sistema comprende, esencialmente, un inmunoensayo en miniatura que emplea un microchip de anticuerpos de captura dirigidos contra las dos proteínas del virus de la gripe, HA y NA. El chip captura proteínas recombinantes trazadoras que a continuación se intercalan en un anticuerpo secundario marcado con fluorescencia. Cuando el virus de la gripe está presente en el espécimen, los antígenos virales desplazan las proteínas trazadoras provocando una reducción en la señal de fluorescencia registrada. El consorcio ha producido todos los componentes moleculares del ensayo, incluidos los anticuerpos monoclonales, y evaluó su sensibilidad de detección. Los científicos han validado el rendimiento del sistema, pero aún falta lograr la sensibilidad deseada. Se dedicaron grandes esfuerzos a la producción de un prototipo de instrumento de lectura de microchips automatizado que puede añadir muestras y reactivos al dispositivo de ensayo. El instrumento contiene un módulo óptico para leer inmunoensayos en microchips con un rango de sensibilidad y dinámico similar al de los escáneres de microchips más sofisticados. El sistema portátil de diagnóstico para centros sanitarios locales del proyecto FLUARRAY realizará cientos de inmunoensayos paralelos diferenciados que ofrecerán una alta capacidad de discriminación en el diagnóstico de la gripe.

Palabras clave

Gripe, diagnóstico, chip, centro sanitario local, hemaglutinina, neuraminidasa, inmunoensayo, anticuerpos

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