Comprendre le mécanisme de la division cellulaire
L'activation de la séparase (une protéase) survient lors de l'anaphase de la mitose ou de la méiose, lorsque les chromosomes se séparent et que chaque chromatide-fille se retrouve à l'un des pôles de la cellule. Toute altération de ce processus peut perturber les mécanismes de tri assurés par la cohésine. Celle-ci est un complexe protéique qui régule la ségrégation des chromosomes lors de la division cellulaire. Indépendamment de sa fonction de protéase, la séparase facilite la fin du cycle cellulaire et la sortie de la mitose. Le projet Chromosome stability («Molecular mechanism of separase dependent PP2ACdc55 downregulation») s'est intéressé aux processus moléculaires de cette activité non protéolytique, et à la façon dont la séparase réduit la quantité d'isoforme Cdc55 de la phosphoprotéine phosphatase 2A (PP2ACdc55) au début de l'anaphase. Le but premier de ce projet financé par l'UE était d'élucider comment la séparase déclenche l'inactivation de la PP2ACdc55 dans la levure en bourgeonnement. Les chercheurs ont employé deux approches. La première a été d'analyser le rôle des régulateurs connus de la PP2A, à savoir les gènes codant pour Ppm1, Ppe1, Rrd1 et Rrd2. Les expériences ont porté sur la délétion de ces régulateurs ou des modifications de leur localisation, de leur abondance et de leur statut après transcription, selon la présence ou l'absence d'une séparase fonctionnelle. Les résultats ont montré le rôle important de Rrd2 dans la régulation de la PP2A au début de l'anaphase. La seconde approche a consisté à étudier le rôle des composants du réseau de signalisation intracellulaire FEAR dans l'inactivation de la PP2ACdc55. Le réseau de régulation FEAR déclenche la libération de la Cdc14p depuis le nucléole lors de l'anaphase. Les chercheurs ont visé spécialement Slk19, une protéine associée au kinétochore et essentielle aux contrôles mitotiques évitant à la cellule de sortir prématurément de la mitose. Slk19 régule la localisation de la séparase. Les travaux ont montré que l'interaction entre la séparase et Slk19 augmente durant l'anaphase. On peut alors supposer que l'activité protéolytique de la séparase n'est pas essentielle, mais que l'extrémité C-terminale pourrait être importante pour sa fonction de sortie de mitose. L'extrémité C-terminale d'une protéine est le côté qui se termine par un acide aminé avec une fonction carboxyle (-COOH) libre. Elle peut porter des signaux de rétention destinés au processus de tri des protéines. Au cours du projet, d'autres expériences ont montré que la protéolyse en temps opportun de régulateurs majeurs peut conduire à l'irréversibilité de la sortie de mitose.
