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Warming Impacts on Estrogenic and Progestagenic Endocrine Disruptors Effects in Fish Liver - A Proof of Concept Study Using Single- and Novel Multi-Cell 3D Cultures of the European Native Brown Trout

Descrizione del progetto

Impatto degli interferenti endocrini estrogenici e progestinici sulle colture di trote in 3D

Gli ormoni steroidei agiscono sugli organismi acquatici come interferenti endocrini (IE). Questa minaccia per gli ecosistemi acquatici sarà oggetto del progetto SPHEROTOX, finanziato dall’UE, che si concentrerà sui test in vitro di un complesso di miscele di IE che comprendono l’etinilestradiolo, contaminante inserito negli appositi elenchi di controllo dell’Unione, e farmaci progestinici emergenti. I ricercatori elaboreranno e applicheranno strumenti all’avanguardia per i test di tossicità in vitro sui pesci, che comprendono sferoidi 3D di cellule epatiche della trota (Salmo trutta) di tipo monocellulare e multicellulare. Il gruppo di ricerca approfondirà la morfologia e la fattibilità delle culture 3D usando la microscopia ottica ed elettronica, compresa l’immunocitochimica. Inoltre, i ricercatori studieranno saggi biochimici multipunto in combinazione con la microspettroscopia Raman e approfondimenti meccanicistici di interferenza ed eventuali biomarcatori dell’esposizione dei pesci ai progestinici.

Obiettivo

In recent years, an increasing number of emerging pollutants were identified in aquatic ecosystems, and one of the major concerns is the presence of sex-steroid hormones and mimics which act on aquatic organisms as endocrine-disrupting compounds (EDCs). The proposed multidisciplinary project will have focus on in vitro testing of complex of EDCs mixtures: the EU watch listed pollutant ethinylestradiol with emergent progestins drugs (levonorgestrel and megestrol acetate), taking into account a standard versus a warming scenario, as a major global change issue. This will be done by developing and exploiting cutting edge in vitro fish toxicity test tools: single-cell and (new in fish studies) multi-cell type 3D spheroids of liver cells (hepatocytes, stellate cells and biliary epithelial cells) of brown trout (Salmo trutta). The project will explore the advantages of 3D cultures, which have been proved to be much more biologically realistic than common 2D cultures, in order to study: (i) their morphology and viability using light and electron microscopy, including immunocytochemistry; (ii) multi end-point biochemical assays in combination with Raman microspectroscopy (novel in 3D culture); (iii) mechanistic insights of disruption and eventual (still unavailable) biomarkers of fish exposure/effect as to progestins. Quantitative gene expression is the method of choice for this task, targeting specific genes related to lipid-metabolism, yolk and eggshell proteins and androgen/estrogen/progestin receptors. An additional innovative contribution of this project is developing new tolls for enforcing the 3Rs (Replacement, Reduction, and Refinement) in fish research. The project will bring to another level the collaboration between the applicant and the host mentor by bidirectional transfer of skills and expertise, while conducting a scientifically innovative project. The strategy will benefit persons while establishing grounds for long-term institutional benefits.

Campo scientifico (EuroSciVoc)

Parole chiave

Programma(i)

Argomento(i)

Meccanismo di finanziamento

MSCA-IF - Marie Skłodowska-Curie Individual Fellowships (IF)

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Invito a presentare proposte

(si apre in una nuova finestra) H2020-WF-2018-2020

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Coordinatore

UNIVERSIDADE DO PORTO
Contributo netto dell'UE
€ 79 907,52
Indirizzo
PRACA GOMES TEIXEIRA
4099-002 Porto
Portogallo
Regione
Continente Norte Área Metropolitana do Porto
Tipo di attività
Higher or Secondary Education Establishments
Collegamenti
Costo totale
€ 79 907,52