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Tracking and guiding artificial enzyme evolution via landscape inference

Descrizione del progetto

Uno sguardo più attento all’evoluzione di enzimi artificiali

L’evoluzione diretta è un metodo efficace per l’ingegneria delle proteine che rappresenta uno degli strumenti più diffusi nella biologia di base e applicata. Il progetto GuideArtifEvol, finanziato dall’UE, introdurrà il sequenziamento di nuova generazione dell’intero gene per supervisionare l’indagine delle varianti a livello di sequenza e caratterizzare quantitativamente il paesaggio adattivo, concentrandosi sugli effetti non additivi delle mutazioni sull’adattamento (epistasi). Queste informazioni saranno incluse nei protocolli di DE per condurre un’esplorazione più efficiente dello spazio di sequenza. Il progetto intende migliorare la comprensione della topologia del paesaggio adattivo dell’enzima e delle sue distorsioni in condizioni di pressioni selettive, nonché chiarire le correlazioni tra sequenza, funzione ed evoluzione nelle proteine.

Obiettivo

Directed evolution is an effective method for protein engineering. The host laboratory is designing innovative techniques for the directed evolution experiments of enzymes, with the possibility to test millions or billions of variants to be tested at each cycle. In this project, I will introduce the use of full-gene next generation sequencing to supervise the exploration of variants at the sequence level and quantitatively characterize the fitness landscape, with a focus on non-additive effects of mutations into fitness (epistasis). Furthermore, this information will be included in DE protocols to guide a more efficient exploration of the sequence space.
The project is a strongly interdisciplinary project consisting of experimental synthetic biology, physics modelling and bioinformatics analysis. It is focused in the study of DNA processing enzymes such as polymerase and endonucleases. The proposal includes the development of specific tools which should have an immediate impact on the scientific community: i. extend the applications of next generation sequencers to characterize full length genetic libraries of protein variants ; ii. adapt quantitative methods, previously developed for sets of structurally homologous proteins and derived from Potts model to study the catalytic properties of during directed evolution. iii. develop a new experimental protocol to control the number of mutations in libraries.
The analysis will provide a better understanding of the topology of the fitness landscape of an enzyme, and its distortions under selective pressures, thereby clarifying the relations between sequence,function and evolution in proteins.

Campo scientifico (EuroSciVoc)

Programma(i)

Argomento(i)

Meccanismo di finanziamento

MSCA-IF-EF-ST - Standard EF

Vedi tutti i progetti finanziati nell’ambito di questo schema di finanziamento

Invito a presentare proposte

(si apre in una nuova finestra) H2020-MSCA-IF-2018

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Coordinatore

ECOLE SUPERIEURE DE PHYSIQUE ET DECHIMIE INDUSTRIELLES DE LA VILLE DEPARIS
Contributo netto dell'UE
€ 196 707,84
Indirizzo
RUE VAUQUELIN 10
75231 Paris
Francia
Regione
Ile-de-France Ile-de-France Paris
Tipo di attività
Higher or Secondary Education Establishments
Collegamenti
Costo totale
€ 196 707,84