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CORDIS - Forschungsergebnisse der EU
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Interrogating native CRISPR arrays to achieve scalable combinatorial screens and dissect genetic redundancy

Projektbeschreibung

Untersuchung mehrerer Gene gleichzeitig zur raschen Erkennung von Redundanzen

Die Ermittlung der genetischen Grundlage von Phänotypen sowie deren Verbindung zu Krankheit und Gesundheit wird durch die genetische Redundanz erschwert. Bei Genomen höherer Organismen kommt es häufig vor, dass zwei oder mehr Gene dieselbe Funktion erfüllen und dass die Deaktivierung einer oder mehrerer von ihnen sich kaum oder gar nicht auf den biologischen Phänotyp auswirken. Durch die CRISPR-Technologie, die auf einem Phänomen bei Prokaryoten zur Geneditierung aufbaut, konnten Forscherinnen und Forscher einen spezifischen DNS-Abschnitt in einer Zelle finden und verändern. Bisher waren zwei Targets jedoch das Maximum, was den Fortschritt bei der Enträtselung der Redundanzen hemmte. Das EU-finanzierte Projekt CRISPRcombo nutzt das Potenzial von CRISPR-Arrays, die auf natürliche Weise mehrere spezifische Guide-RNAs produzieren. Mittels CRISPR-Arrays entwickelt das Forschungsteam ein Hochdurchsatz-Screening, um auf viele Gen-Targets gleichzeitig hochzuskalieren. Das Projekt geht davon aus, unser Verständnis für CRISPR-Arrays und genetische Mechanismen mit Redundanz erheblich voranbringen zu können.

Ziel

A ubiquitous yet poorly understood theme pervading biology is redundancy, wherein seemingly equivalent components drive shared processes. In cases from development to pathogenesis, untangling the ensuing web of potential genetic interactions can be virtually impossible with conventional techniques. CRISPR technologies, with their propensity for multiplexing, are well poised to address this challenge. However, current CRISPR-based screens have not exceeded more than two targets at a time. Here, I will achieve a major leap forward for CRISPR-based screens and dissecting redundancy by harnessing a core yet underexplored part of CRISPR: CRISPR arrays. CRISPR arrays naturally form the immunological memory of CRISPR-Cas systems and produce multiple targeting gRNAs processed from a single transcript. The arrays are highly compact, genetically stable, and can encode hundreds of gRNAs. However, the repetitive repeats within each array have hampered their construction and widespread adoption. My group recently made a breakthrough with the modular one-pot assembly of long arrays and array libraries. This capability grants us the unique opportunity to develop the first high-throughput, CRISPR-based screens that readily scale to many gene targets at a time. In parallel, our first assembled arrays highlighted technical constraints to designing robust and highly active arrays. I posit that native CRISPR arrays have faced similar limitations and thus can inform the design of array libraries. I thus propose to
1) Develop design rules for CRISPR arrays yielding only intended and uniformly abundant guide RNAs.
2) Elucidate and exploit why CRISPR arrays are genetically stable.
3) Perform scalable combinatorial screens using redundancy by small RNAs in E. coli as a compelling case study.
If successful, this project will reveal unexplored properties of CRISPR arrays and, for the first time, achieve scalable combinatorial screens for interrogating redundancy throughout biology.

Wissenschaftliches Gebiet (EuroSciVoc)

CORDIS klassifiziert Projekte mit EuroSciVoc, einer mehrsprachigen Taxonomie der Wissenschaftsbereiche, durch einen halbautomatischen Prozess, der auf Verfahren der Verarbeitung natürlicher Sprache beruht. Siehe: Das European Science Vocabulary.

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Schlüsselbegriffe

Schlüsselbegriffe des Projekts, wie vom Projektkoordinator angegeben. Nicht zu verwechseln mit der EuroSciVoc-Taxonomie (Wissenschaftliches Gebiet).

Programm/Programme

Mehrjährige Finanzierungsprogramme, in denen die Prioritäten der EU für Forschung und Innovation festgelegt sind.

Thema/Themen

Aufforderungen zur Einreichung von Vorschlägen sind nach Themen gegliedert. Ein Thema definiert einen bestimmten Bereich oder ein Gebiet, zu dem Vorschläge eingereicht werden können. Die Beschreibung eines Themas umfasst seinen spezifischen Umfang und die erwarteten Auswirkungen des finanzierten Projekts.

Finanzierungsplan

Finanzierungsregelung (oder „Art der Maßnahme“) innerhalb eines Programms mit gemeinsamen Merkmalen. Sieht folgendes vor: den Umfang der finanzierten Maßnahmen, den Erstattungssatz, spezifische Bewertungskriterien für die Finanzierung und die Verwendung vereinfachter Kostenformen wie Pauschalbeträge.

ERC-COG - Consolidator Grant

Alle im Rahmen dieses Finanzierungsinstruments finanzierten Projekte anzeigen

Aufforderung zur Vorschlagseinreichung

Verfahren zur Aufforderung zur Einreichung von Projektvorschlägen mit dem Ziel, eine EU-Finanzierung zu erhalten.

(öffnet in neuem Fenster) ERC-2019-COG

Alle im Rahmen dieser Aufforderung zur Einreichung von Vorschlägen finanzierten Projekte anzeigen

Gastgebende Einrichtung

HELMHOLTZ-ZENTRUM FUR INFEKTIONSFORSCHUNG GMBH
Netto-EU-Beitrag

Finanzieller Nettobeitrag der EU. Der Geldbetrag, den der Beteiligte erhält, abzüglich des EU-Beitrags an mit ihm verbundene Dritte. Berücksichtigt die Aufteilung des EU-Finanzbeitrags zwischen den direkten Begünstigten des Projekts und anderen Arten von Beteiligten, wie z. B. Dritten.

€ 2 000 000,00
Adresse
INHOFFENSTRASSE 7
38124 Braunschweig
Deutschland

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Region
Niedersachsen Braunschweig Braunschweig, Kreisfreie Stadt
Aktivitätstyp
Research Organisations
Links
Gesamtkosten

Die Gesamtkosten, die dieser Organisation durch die Beteiligung am Projekt entstanden sind, einschließlich der direkten und indirekten Kosten. Dieser Betrag ist Teil des Gesamtbudgets des Projekts.

€ 2 000 000,00

Begünstigte (1)

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