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Novel Electro-Responsive Protein Separation Method with Magnetic Nanoparticles

Projektbeschreibung

Neues Verfahren zur Reinigung von Proteinen – mit magnetischen Nanopartikeln

Bei der Herstellung von Arzneimitteln ist die Reinigung ein wichtiger Schritt. Unerwünschte Stoffe, die die Wirksamkeit einschränken würden, werden dabei weitestgehend entfernt. Sogenannte Protein-Tags, d. h. an Proteine angeheftete Peptidsequenzen, kommen üblicherweise dort zum Einsatz, wo exprimierte Proteine erkannt und gereinigt werden sollen. Das EU-finanzierte Projekt NERS wird effizientere Möglichkeiten der Proteinreinigung erforschen, um die Eigenschaften pharmazeutisch relevanter Proteine, wie Antikörpern, weniger in Mitleidenschaft zu ziehen. Dazu wird es frühere Arbeiten zum Design solcher Protein-Tags fortführen, bei denen bereits eine hohe Bindungsaffinität und Selektivität für magnetische Eisenoxide erzielt werden konnten. Im Projekt wird ein Elutionsverfahren entwickelt, mit dem sich Proteine mit Peptid-Tags von solchen Proteinen trennen lassen, die mit elektrischen Feldern interagieren. Dieser Prozess wird klarer zeigen, wie sich Proteine an Eisenoxid-Nanopartikel anbinden und eine Doppelschicht bilden.

Ziel

Pharmaceuticals for cancer therapies and other diseases are very since the production of therapeutic molecules such as antibodies is costly and every production process needs to be developed individually. Especially purification processes, which make up to 80-90% of the whole production, need to be improved or new ideas need to be developed. Short peptide sequences, so called “tags”, can be used to create new purification strategies based on the biomolecule recognition of these sequences. Magnetic iron oxide nanoparticles are an interesting counterpart for peptide tags as their properties facilitate an easy handling and manipulation. The key to the design of high-affinity peptide tags lies in an in-depth understanding of surface-peptide recognition patterns. I developed such a magnetite-binding peptide tag which allows the purification of tagged model proteins from fermentation broths by changing the surrounding media. However, such pH and buffer switches might also alter the properties of pharmaceutically relevant proteins such as antibodies. The challenge of this project is to establish a novel elution process based on an electrical potential switch instead of a pH switch. The process contains the magnetic separation of proteins containing the peptide tags and the elution of proteins based on the change of tag-particle interactions with electric fields. The use of this system will help to understand the binding of proteins to iron oxide nanoparticles and the formation of an electrochemical double layer in external fields. The electrical double layer formation is not only interesting in biotechnological processes but for the understanding of electrochemical catalysis and energy storage. This idea might pave the way to completely new approaches in biomolecule recognition, protein detection and purification.

Koordinator

TECHNISCHE UNIVERSITAET MUENCHEN
Netto-EU-Beitrag
€ 176 036,16
Adresse
Arcisstrasse 21
80333 Muenchen
Deutschland

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Region
Bayern Oberbayern München, Kreisfreie Stadt
Aktivitätstyp
Higher or Secondary Education Establishments
Links
Gesamtkosten
€ 176 036,16

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