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Contenuto archiviato il 2024-04-15

RATIONAL MODIFICATION OF THE SPECIFICITY OF PHOSPHOSLIPASE A2

Obiettivo


Phospholipase A2 is a member of an important class of lipid degrading enzymes. To design relevant mutants of possible industrial significance and inhibitors of pharmaceutical use it is necessary to understand the molecular basis of the function of the enzyme. One interesting aspect of the activity of these enzymes is much higher activity for phospholipids in aggregates such as micelles and monolayers than for single phospholipid molecules in water.
The general objective of this project is to understand how phospholipase A2 binds aggregated phospholipids.

Simulation of phospholipid monolayers and phospholipase A2 on an aggregated substrate has been carried out. The monolayer appears to be highly disordered in contrast the Langmuir-Blodgett films studies in other simulations where the headgroups were confined to a planar surface. This indicates the importance of using explicitly defined solvent for the study of monolayers. The simulation of phospholipase A2 at a monolayer is in progress due to the complexity of the simulation and the inherently flexible nature of the monolayers. The enzyme was positioned with the interfacial recognition site towards the monolayer surface with the aim of studying the monolayer phospholipase interactions. A further aim is to study the movement of the substrate in and out of the active site of phospholipase A2.

A reasonable understanding of how phospholipase A2 binds monomeric substrates has been obtained. This understanding is being exploited in engineering phopholipases A2 with modified specificities. Simple electrostatic calculations have been fairly successful in predicting the change in stability of proteins due to charge engineering. Improved calculations indicate large compensating interaction energies for the mutant that did not behave as expected. The activity of a double mutant N89D/E92K is low and suggests that residue 92 is important in interacting with aggregated substrates either directly or possibly via calcium. An understanding of the dynamic behaviour of monolayers of phospholipids has also developed. The monolayers are intrinsically more flexible than bilayers. Explicit description of the water appears to be essential to describe the behaviour of amphiphile monolayers. Simulation of the monolayer-phospholipase complex is now in progress.

Campo scientifico (EuroSciVoc)

CORDIS classifica i progetti con EuroSciVoc, una tassonomia multilingue dei campi scientifici, attraverso un processo semi-automatico basato su tecniche NLP. Cfr.: Il Vocabolario Scientifico Europeo.

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Programma(i)

Programmi di finanziamento pluriennali che definiscono le priorità dell’UE in materia di ricerca e innovazione.

Argomento(i)

Gli inviti a presentare proposte sono suddivisi per argomenti. Un argomento definisce un’area o un tema specifico per il quale i candidati possono presentare proposte. La descrizione di un argomento comprende il suo ambito specifico e l’impatto previsto del progetto finanziato.

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Invito a presentare proposte

Procedura per invitare i candidati a presentare proposte di progetti, con l’obiettivo di ricevere finanziamenti dall’UE.

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Meccanismo di finanziamento

Meccanismo di finanziamento (o «Tipo di azione») all’interno di un programma con caratteristiche comuni. Specifica: l’ambito di ciò che viene finanziato; il tasso di rimborso; i criteri di valutazione specifici per qualificarsi per il finanziamento; l’uso di forme semplificate di costi come gli importi forfettari.

CSC - Cost-sharing contracts

Coordinatore

NETHERLANDS RESEARCH SCHOOL FOR ASTRONOMY - LEGALLY REPRESENTED BY UNIVERSITY OF GRONINGEN
Contributo UE
Nessun dato
Indirizzo
5,Broerstraat 5
9712 CP GRONINGEN
Paesi Bassi

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Costo totale

I costi totali sostenuti dall’organizzazione per partecipare al progetto, compresi i costi diretti e indiretti. Questo importo è un sottoinsieme del bilancio complessivo del progetto.

Nessun dato
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