Détection de mutations dans le cancer du sein métastatique
Près de 25 % des patientes souffrant d'un cancer du sein développeront une maladie métastatique incurable. Pendant le processus métastatique, les cellules cancéreuses se dissocient du site de la tumeur primaire, entrent dans le système lymphatique et sanguin et colonisent des organes éloignés. Comme ces sites sont difficiles d'accès, les cellules tumorales circulantes (CTC) pourraient servir d'intermédiaires pour la formation des tumeurs métastatiques. En se basant sur cette idée, le projet CAREMORE (Cancer responsiveness monitoring based on resistance mutations in CTCs), financé par l'UE, s'est proposé de caractériser moléculairement les cellules tumorales circulantes en exploitant simultanément deux technologies. La première méthode utilise la détection multiplex in situ de quatre protéines exprimées dans les CTC et la comparaison des résultats obtenus avec ceux de la tumeur primaire. La méthodologie évalue ainsi la présence et l'activité du récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2), connu pour être surexprimé dans le cancer du sein, et de deux protéines, p4E-bp et pS6, situées en aval de la voie de transduction du signal de PIK3CA. L'essai s'appuie sur une détection par fluorescence utilisant deux anticorps ciblant la même protéine et la coloration nucléaire des cellules tumorales circulantes isolées pour obtenir une double reconnaissance et par conséquent une plus grande spécificité. Pour l'isolation et le profilage des CTC, le consortium a développé une nouvelle méthode consistant à placer des cellules isolées à partir de la couche leucocytaire (buffy coat), sur une lame de verre et à effectuer une double immuno-coloration contre la cytokératine et un récepteur de la molécule d'adhésion des cellules épithéliales (EpCAM). Après identification, les cellules tumorales circulantes isolées sont soumises à un test PCR (amplification par polymérase) afin de détecter les différentes mutations du gène PIK3CA. Les chercheurs ont réalisé le calibrage initial de ces essais en utilisant des lignées cellulaires de référence, mais cette approche a été in fine, utilisée pour l'orientation thérapeutique de patientes atteintes d'un cancer du sein métastatique. Le consortium souhaitait tout particulièrement déterminer le bénéfice thérapeutique de cette approche pour les patientes dont les CTC étaient HER2 + et la tumeur primaire HER2 négative. Au total, les travaux du projet CAREMORE ont abordé l'un des principaux défis de l'oncologie, à savoir une médecine personnalisée. L'adaptation du traitement aux caractéristiques de chaque patient devrait de fait maximiser la réponse des patients au traitement et en minimiser la toxicité.
Mots‑clés
Cancer du sein, métastases, cellules tumorales circulantes, CAREMORE, PIK3CA
