Otra ocasión para echar los dientes
El desarrollo de un diente se basa en una serie de rutas complejas en las que la interacción entre proteínas determina con precisión la cronología de las distintas etapas. La ameloblastina es una proteína clave que controla la elongación de los cristales de esmalte y dirige la mineralización de éste. Científicos de la Universidad Hebrea de Jerusalén, asociada al proyecto MATRIX, diseñaron un protocolo novedoso para obtener altas concentraciones de ameloblastina pura. Para lograrlo, se realizó un novedoso constructo génico con ADN complementario (cDNA) humano que codifica la proteína entera al que se acoplaron una cola de histidina (His tag) en el extremo C-terminal necesaria para el proceso de purificación y un péptido señal de abeja melífera para lograr una secreción eficaz en células de insectos. El constructo génico se incorporó a un baculovirus para su clonación y luego la proteína recombinante se produjo infectando células de palomilla nocturna (Spodoptera frugiperda). Tras la purificación en placa, se seleccionó un clon viral en función de la tasa de producción de la proteína más eficaz. Los factores que se sopesaron a la hora de seleccionar el clon de mejor calidad fueron la viabilidad celular, la ratio de infección y la expresión de la proteína a diferentes tiempos postinfección. Una de las ventajas de este método es que la proteína recombinante secretada presenta las mismas modificaciones que la ameloblastina secretada de forma natural. Sin embargo, está exenta del péptido señal que se le había incorporado para mejorar la eficacia de su producción. Además, gracias a la cola de histidina, el proceso de purificación consta de un único paso de breve duración. En el desarrollo de un diente participan muchas proteínas, entre ellas la amelogenina y la tuftelina. El protocolo desarrollado también se puede aplicar para la producción en serie de estas proteínas. La amelogenina tiene especial importancia, al representar el 90\;% de las proteínas presentes en la fase de desarrollo del esmalte. Como es previsible, estos descubrimientos pueden aplicarse en el campo de la prostodoncia para elaborar prótesis dentales para pacientes con ausencia total o parcial de piezas dentarias.
