Opis projektu
Logistyka chloroplastów i rola kompleksów przenoszących białka
Komórki przypominają potężne i złożone fabryki, składające się z szeregu oddzielnych organelli, które umożliwiają podział zadań oraz zasobów potrzebnych do ich realizacji, zwiększając przy tym sprawność procesów. Procesy logistyczne zachodzące wewnątrz komórek bywają niezwykle złożone, zwłaszcza biorąc pod uwagę fakt, że białka są kodowane w jądrze, budowane przez rybosomy, a następnie przenoszone do miejsca docelowego wewnątrz komórki. Chloroplasty to fotosyntetyczne organella wewnątrz komórek roślin, które pełnią rolę specjalistycznych molekularnych maszyn, zajmujących się translokacją białek przez dwuścienną błonę. Translokony, bo tak nazywają się te kompleksy znajdujące się na błonie chloroplastów, mają dwa osobne tryby konfiguracji, zależne od rodzaju transportowanego białka. Naukowcy skupieni wokół finansowanego przez Unię Europejską projektu TOC-maker badają szczegóły procesu budowy białek oraz ostatecznej organizacji strukturalnej kompleksów translokonów.
Cel
Plants convert solar energy into chemical energy by the process called photosynthesis in a specialized compartment of the cell known as chloroplasts. Chloroplasts are majorly enriched with nucleus-encoded proteins and to import them, chloroplast outer and inner envelope membranes are equipped with apparatus called the TOC and TIC translocons, respectively. For the TOC apparatus, there are two major configurations, TOC-P and TOC-H, reported so far, which import highly abundant, Photosynthetic and Housekeeping pre-proteins, respectively. TOC-P and TOC-H are multiprotein complexes which must be specifically assembled for proper development and homeostasis of the chloroplast. Due to the dynamic nature of the translocons, component synthesis and assembly must be rapid and tightly coupled, making the process difficult to investigate. Thus, understanding the mechanisms of the assembly process is both challenging and exciting. Biogenesis of TOC complexes is rapidly enhanced during chloroplast development or de-etiolation, and I will exploit this process to investigate the assembly of different TOC configurations, using the model plant Arabidopsis thaliana. For this purpose, transgenic plants expressing epitope-tagged TOC components and cells expressing nascent polypeptides of TOC components with stalled ribosomes will be generated. Proteins transiently interacting with new TOC components, which are predicted to assist integration and assembly of the TOC complex, will be studied by using affinity purification, pulse-chase experiments, and other biochemical techniques, and thus a sequence of assembly events will be elucidated. Although the molecular composition of the TOC protein import machinery has been well studied, the detailed structural organization of TOC complexes has not yet been elucidated. I will address this knowledge gap by analysing affinity-purified TOC complexes from mature chloroplasts at high resolution by cryo-electron microscopy.
Dziedzina nauki
- engineering and technologyenvironmental engineeringenergy and fuelsrenewable energysolar energy
- natural sciencesbiological sciencesbiochemistrybiomoleculesproteins
- natural sciencesphysical sciencesopticsmicroscopy
- medical and health sciencesbasic medicinephysiologyhomeostasis
- natural sciencesbiological sciencesbotany
Słowa kluczowe
Program(-y)
Temat(-y)
System finansowania
MSCA-IF - Marie Skłodowska-Curie Individual Fellowships (IF)Koordynator
OX1 2JD Oxford
Zjednoczone Królestwo