Ziel
DEVELOPMENT OF STABLE CLONING VECTORS IN AN IMPORTANT INDUSTRIAL MICROORGANISM : BACILLUS SUBTILIS. SUCH DEVELOPMENT HAS BEEN HINDERED SO FAR BY SEGREGATIONAL AND STRUCTURAL INSTABILITY OF RECOMBINANT PLASMIDS. INVESTIGATION OF THE MECHANISM OF PLASMID INSTABILITY IS REQUIRED FOR SUCCESSFULL GENETIC ENGINEERING NOT ONLY IN BACILLUS BUT ALSO IN OTHER POTENTIAL INDUSTRIAL GRAM POSITIVE BACTERIA.
The objectives of this project were to investigate the mechanism whereby genetic material is rearranged in, or entirely lost from cells, and based on this knowledge, to develop new systems which allow stable maintenance of foreign genetic material. The host organisms used were Escherichia coli and Bacillus subtilis. Particular emphasis was placed on investigation of the mode of replication of plasmids used as cloning vectors. The relationship between the efficiency of plasmid replication and segregational stability was examined. The fidelity with which certain sequences are duplicated when placed on plasmids which replicate by different mechanisms was evaluated. The stability of foreign genes inserted into different chromosomal locations was also studied.
The mechanism whereby genetic material is rearranged in, or entirely lost from cells was investigated and based on this knowledge, new systems which allow stable maintenance of foreign genetic material were developed. The host organisms used were Escherichia coli and Bacillus subtilis. Particular emphasis was placed on investigation of the mode of replication of plasmids used as cloning vectors. The relationship between the efficiency of plasmid replication and segregational stability was examined. The fidelity with which certain sequences are duplicated when placed on plasmids which replicate by different mechanisms was evaluated. The stability of foreign genes inserted into different chromosomal locations was also studied.
Many plasmids, which are used as cloning vectors in Gram positive bacteria, replicate by a rolling circle type mechanism. This mode of replication was found to be error prone and leads to structural instability at high frequency. Other plasmids, which replicate by a different mechanism, resulted in structural instability at a much lower frequency, making them ideal candidates for cloning vectors. It was found that a decrease in the efficiency with which plasmid replication occurs leads to segregational instability of the plasmid. An alternative to cloning genes on plasmids is to insert them into the chromosome. It was found that genes could be stably maintained in the chromosome of B subtilis. It was also found that genes could be more stably maintained in some chromosomal locations than in others. The main conclusion drawn from these studies is that deoxyribonucleic acid (DNA) replication has a profound effect on the stability of genetic information.
DEVELOPMENT OF STABLE HIGH-LEVEL EXPRESSION VECTORS WHICH WOULD REPLICATE IN BACILLUS WITH A CONSTITUTIVELY LOW AND INDUCIBLE HIGH COPY NUMBER AND A STRONG CONTROLLABLE PROMOTER.
IN PARTICULAR :
1. THE REGION INVOLVED IN THE STABLE MAINTENANCE OF THE BACILLUS ENDOGENOUS PLASMID PBAA1 WILL BE IDENTIFIED.
2. THIS REGION WILL BE COMBINED WITH REPLICONS HAVING A CONSTITUTIVELY LOW BUT INDUCIBLY HIGH COPY NUMBER.
3. IN ORDER TO CONSTRUCT STABLE EXPRESSION VECTORS, THERMOINDUCIBLE PROMOTERS (EITHER HEAT SHOCK PROMOTERS OR PROMOTERS UNDER THE CONTROL OF TEMPERATIVE SENSITIVE REPRESSORS) WILL BE CLONED ONTO THE STABLE REPLICON.
Wissenschaftliches Gebiet (EuroSciVoc)
CORDIS klassifiziert Projekte mit EuroSciVoc, einer mehrsprachigen Taxonomie der Wissenschaftsbereiche, durch einen halbautomatischen Prozess, der auf Verfahren der Verarbeitung natürlicher Sprache beruht. Siehe: Das European Science Vocabulary.
CORDIS klassifiziert Projekte mit EuroSciVoc, einer mehrsprachigen Taxonomie der Wissenschaftsbereiche, durch einen halbautomatischen Prozess, der auf Verfahren der Verarbeitung natürlicher Sprache beruht. Siehe: Das European Science Vocabulary.
- Naturwissenschaften Biowissenschaften Mikrobiologie Bakteriologie
- Naturwissenschaften Biowissenschaften Genetik DNS
- Medizin- und Gesundheitswissenschaften Medizinische Biotechnologie Gentechnologie
- Naturwissenschaften Biowissenschaften Genetik Chromosom
Sie müssen sich anmelden oder registrieren, um diese Funktion zu nutzen
Programm/Programme
Mehrjährige Finanzierungsprogramme, in denen die Prioritäten der EU für Forschung und Innovation festgelegt sind.
Mehrjährige Finanzierungsprogramme, in denen die Prioritäten der EU für Forschung und Innovation festgelegt sind.
Thema/Themen
Aufforderungen zur Einreichung von Vorschlägen sind nach Themen gegliedert. Ein Thema definiert einen bestimmten Bereich oder ein Gebiet, zu dem Vorschläge eingereicht werden können. Die Beschreibung eines Themas umfasst seinen spezifischen Umfang und die erwarteten Auswirkungen des finanzierten Projekts.
Daten nicht verfügbar
Aufforderungen zur Einreichung von Vorschlägen sind nach Themen gegliedert. Ein Thema definiert einen bestimmten Bereich oder ein Gebiet, zu dem Vorschläge eingereicht werden können. Die Beschreibung eines Themas umfasst seinen spezifischen Umfang und die erwarteten Auswirkungen des finanzierten Projekts.
Aufforderung zur Vorschlagseinreichung
Verfahren zur Aufforderung zur Einreichung von Projektvorschlägen mit dem Ziel, eine EU-Finanzierung zu erhalten.
Daten nicht verfügbar
Verfahren zur Aufforderung zur Einreichung von Projektvorschlägen mit dem Ziel, eine EU-Finanzierung zu erhalten.
Finanzierungsplan
Finanzierungsregelung (oder „Art der Maßnahme“) innerhalb eines Programms mit gemeinsamen Merkmalen. Sieht folgendes vor: den Umfang der finanzierten Maßnahmen, den Erstattungssatz, spezifische Bewertungskriterien für die Finanzierung und die Verwendung vereinfachter Kostenformen wie Pauschalbeträge.
Finanzierungsregelung (oder „Art der Maßnahme“) innerhalb eines Programms mit gemeinsamen Merkmalen. Sieht folgendes vor: den Umfang der finanzierten Maßnahmen, den Erstattungssatz, spezifische Bewertungskriterien für die Finanzierung und die Verwendung vereinfachter Kostenformen wie Pauschalbeträge.
Koordinator
DUBLIN 2
Irland
Die Gesamtkosten, die dieser Organisation durch die Beteiligung am Projekt entstanden sind, einschließlich der direkten und indirekten Kosten. Dieser Betrag ist Teil des Gesamtbudgets des Projekts.