Ziel
DEVELOPMENT OF A STABLE GENETIC VECTOR FOR THE ANIMALS AND THE YEASTS.
Research has been carried out to isolate and study replication origins and telomeres and to assemble the different elements into linear vectors, in order to improve gene transfer in eukaryotes. The replication origins studied came from viruses (bovine papilloma virus (BPV); simian virus 40 (SV40) and African swine fever virus (ASFV)) and chromosomes from animal cells. Plasmids containing the BPV origin of replication function could be injected into Xenopus embryos. Much is known about the structure of telomeres from lower eucaryotes and these sequences were used for the assembly experiments. In addition, telomeric segments were isolated and analyzed from human cells and ASFV. The role of simple repeating deoxyribonucleic acid (DNA) sequences on integration was determined and a putative signal for integration identified. Several linear vectors were assembled and their stability determined. Extracts from cells infected with ASFV enabled the in vitro replication of DNA. Human telomeric sequences were cloned in Escherichia coli and in yeast, and theviral telomeres of ASFV were isolated. A putative signal for integration (d(CG)) was identified. A linear vector containing the BVP origin of replication and Tetrahymena telomeres was shown to be stable in Xenopus oocytes.
GOOD, AUTONOMOUSLY REPLICATING VECTORS FOR ANIMAL OR PLANT CELLS DO NOT EXIST, AND MOST ATTEMPTS TO INTRODUCE GENES INTO THESE CELLS HAVE RELIED ON THE MATERIAL BECOMING INTEGRATED INTO ONE OF THE CHROMOSOMES OF THE HOST CELL. ATTEMPTS TO MAKE USE OF ARTIFICIALLY CONSTRUCTED CIRCULAR PLASMIDS HAVE BEEN TOTALLY UNSUCCESSFUL.
IT MAY THUS VERY WELL BE THAT THE MOST APPROPRIATE VECTOR WILL NOT BE CIRCULAR, BUT WILL HAVE A LINEAR STRUCTURE. THIS PROPOSITION IS REINFORCED IF ONE CONSIDERS THAT THE CHROMOSOMES OF HIGHER ORGANISMS ARE ALMOST INVARIABLY LINEAR AND THAT CIRCULAR PLASMIDS ARE NOT NORMALLY FOUND IN THE CELLS OF THESE ORGANISMS.
IDEALLY SUCH A VECTOR SHOULD CONTAIN A CENTROMERE FUNCTION TO ENSURE ITS STABILITY AT LOW COPY NUMBER.
IT IS THE AIM OF THIS PROPOSAL TO CONSTRUCT LINEAR VECTORS, AND EVENTUALLY ARTIFICIAL LINEAR CHROMOSOMES, FOR THE PURPOSE OF IMPROVING GENE TRANSFER AND GENE CLONING IN EUKARYOTIC CELLS.
THE VECTORS WILL BE CONSTRUCTED USING COMPONENTS DERIVED FROM NATURALLY OCCURING LINEAR PLASMIDS, CHROMOSOMES, AND ANIMAL VIRUSES. THE VECTORS WILL BE DESIGNED FOR USE IN MAMMALIAN HOST CELLS, BUT THERE IS A VERY GOOD CHANCE THAT VECTORS USEFUL FOR YEASTS WILL BE PRODUCED AS FALLOUT OF THE MAIN PROJECT. APART FROM THE PRODUCTION OF POTENTIALLY USEFUL EUKARYOTIC VECTORS, FURTHER UNDERSTANDING OF REPLICATION AS WELL AS TELOMERE AND CENTROMERE WILL NO DOUBT BE GAINED.
THE POTENTIAL FOR NATURALLY OCCURING LINEAR PLASMIDS AND THE ABILITY OF THEIR ENDS TO FUNCTION AS TELOMERES WILL BE TESTED IN THE CELLS OF HIGHER ORGANISMS AND THE ABILITY OF THEIR ENDS TO FUNCTION AS TELOMERES WILL BE TESTED IN THE CELLS OF HIGHER ORGANISMS. VARIOUS ELEMENTS IDENTIFIED AS BEING POTENTIAL COMPONENTS OF AN ARTIFICIAL MINICHROMOSOME, BUT DERIVED FROM DIVERSE SOURCES, WILL BE ASSEMBLED AND THEIR FUNCTIONS TESTED AFTER INTRODUCTION INTO THE CELLS OF YEAST AND HIGHER ORGANISMS.
Wissenschaftliches Gebiet (EuroSciVoc)
CORDIS klassifiziert Projekte mit EuroSciVoc, einer mehrsprachigen Taxonomie der Wissenschaftsbereiche, durch einen halbautomatischen Prozess, der auf Verfahren der Verarbeitung natürlicher Sprache beruht. Siehe: Das European Science Vocabulary.
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Mehrjährige Finanzierungsprogramme, in denen die Prioritäten der EU für Forschung und Innovation festgelegt sind.
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Aufforderungen zur Einreichung von Vorschlägen sind nach Themen gegliedert. Ein Thema definiert einen bestimmten Bereich oder ein Gebiet, zu dem Vorschläge eingereicht werden können. Die Beschreibung eines Themas umfasst seinen spezifischen Umfang und die erwarteten Auswirkungen des finanzierten Projekts.
Daten nicht verfügbar
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Aufforderung zur Vorschlagseinreichung
Verfahren zur Aufforderung zur Einreichung von Projektvorschlägen mit dem Ziel, eine EU-Finanzierung zu erhalten.
Daten nicht verfügbar
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Finanzierungsplan
Finanzierungsregelung (oder „Art der Maßnahme“) innerhalb eines Programms mit gemeinsamen Merkmalen. Sieht folgendes vor: den Umfang der finanzierten Maßnahmen, den Erstattungssatz, spezifische Bewertungskriterien für die Finanzierung und die Verwendung vereinfachter Kostenformen wie Pauschalbeträge.
Finanzierungsregelung (oder „Art der Maßnahme“) innerhalb eines Programms mit gemeinsamen Merkmalen. Sieht folgendes vor: den Umfang der finanzierten Maßnahmen, den Erstattungssatz, spezifische Bewertungskriterien für die Finanzierung und die Verwendung vereinfachter Kostenformen wie Pauschalbeträge.
Koordinator
ROMA
Italien
Die Gesamtkosten, die dieser Organisation durch die Beteiligung am Projekt entstanden sind, einschließlich der direkten und indirekten Kosten. Dieser Betrag ist Teil des Gesamtbudgets des Projekts.