Une nouvelle génération de thérapies du cancer
Les médicaments conjugués d'anticorps (ADC) associent des toxines cellulaires avec des anticorps thérapeutiques. Ils se sont avérés très efficaces dans la thérapie du cancer. Cependant, le caractère aléatoire de la conjugaison chimique peut modifier des parties fonctionnelles de l'anticorps et de sa structure, et donc diminuer sa stabilité et sa spécificité. En outre, cette méthode conduit à des médicaments conjugués hétérogènes, avec une proportion variable de toxines conjuguées et un mélange de molécules conjuguées. C'est pourquoi les scientifiques du projet MABTOX, financé par l'UE, ont conçu et validé deux nouvelles méthodes de conjugaison par enzyme. Ils ont utilisé des enzymes de type sortase, des trans-peptidases qui reconnaissent certaines suites d'acides aminés et peuvent faciliter le couplage de protéines via des liaisons covalentes. La deuxième méthode de conjugaison utilise la technique split-intein, qui relie l'une des deux protéines à conjuguer à la partie N-terminale et l'autre à la partie C-terminale du split-intein. Les chercheurs ont testé les nouvelles méthodes pour fabriquer un ADC déjà approuvé cliniquement pour le traitement de la leucémie, du lymphome de Hodgkin et des tumeurs solides gpNMB+ (positives pour la glycoprotéine NMB). Ils ont défini et optimisé la conjugaison de la toxine MMAF aux anticorps par rapport aux molécules de surface CD30 et gpNMB, à l'aide des enzymes sortase. Ils ont ainsi obtenu un rendement de 80 % de la conjugaison, et fabriqué en quantité suffisante cette nouvelle génération d'ADC. Les chercheurs ont caractérisé en détail les ADC ainsi produits, via HPLC et spectrométrie de masse, pour vérifier l'ajout de la toxine au site de conjugaison prévu, ce qui est déterminé par la position de l'étiquette sortase. En outre, l'anticorps reste parfaitement intact, avec le poids moléculaire attendu. Les chercheurs ont testé in vitro la capacité des nouveaux ADC à tuer les cellules, lors de test conduits sur des lignées de cellules tumorales. Les résultats ont été similaires à ceux des ADC de référence, les MMAF-ADC s'avérant tout aussi efficaces contre le lymphome de Hodgkin et les mélanomes. L'effet anti-tumoral était bien réalisé via la liaison spécifique des ADC. Les travaux du projet MABTOX ont démontré que la conjugaison d'anticorps via l'enzyme sortase conduit à des ADC pleinement fonctionnels, validant ainsi la méthode pour un usage clinique.
