Introduzione di nuovi biomarcatori per le disfunzioni penfigoidi
Le penfigoidi (PE) sono un gruppo di gravi disfunzioni cutanee bollose autoimmuni croniche, che colpiscono abitualmente gli anziani. Queste sono caratterizzate clinicamente da lesioni simili a scottature (bolle). La loro incidenza è stata associata a difetti nelle cellule epiteliali che tappezzano la pelle e le membrane delle mucose, e a malattie autoimmuni. Il consorzio PEMPHIGOIDS & IMMUNITY ha eseguito un'analisi sistematica delle PE utilizzando approcci perfezionati per sviluppare diagnostiche nuove e migliorate. Il lavoro di ricerca si è concentrato sugli antigeni indicati dagli anticorpi del paziente penfigoide. Sono state preparate costruzioni di proteine ricombinanti (espresse in baculovirus), che comprendevano subdomini critici sia di antigeni BP180 (collagene XVII, proteina che si inserisce nella membrana) che di antigeni citoplasmatici BP230. Le nuove costruzioni sono state validate con test clinici che implicavano i sieri di vaste coorti di pazienti, e sono stati sviluppati nove nuovi saggi diagnostici d'immunosaggio ELISA. I risultati hanno rivelato che i metodi basati su BP180 e BP230 possono essere sfruttati come marcatori diagnostici per l'attività e il decorso della malattia. Le prove legate ai domini antigenici BP180 sono risultate più efficienti. Per migliorare l'immunosaggio ELISA attualmente in commercio (basato su un subdominio NC16A di BP180), sono state preparate costruzioni procariotiche ricombinanti. I ricercatori sono riusciti a individuare gli eventi intramolecolari di diffusione del determinante antigenico durante il decorso della malattia, migliorando i risultati dell'immunosaggio esistente. Sono stati sviluppati sei nuovi ELISA basati sui determinanti antigenici identificati mediante screening di una libreria lambda di determinanti antigenici casuali BP180 a fronte di sieri di pazienti penfigoidi bollosi. Sono stati anche eseguiti test clinici su sieri di pazienti penfigoidi usando l'ELISA basato su laminina 5, un legante d'adesione molecolare. Il legante era stato purificato dalla linea cellulare di un carcinoma squamoso in mezzo condizionato. Il nuovo saggio ha individuato reattività anti-laminina 5 in certi sieri penfigoidi bollosi e nella maggior parte di quelli della membrana delle mucose esaminati. È stata stabilita una correlazione con la gravità clinica di questi ultimi. I nuovi saggi diagnostici summenzionati potranno gettare luce sulla patofisiologia delle PE, migliorando il trattamento dei pazienti. Con le loro caratteristiche distintive di alta sensibilità e specificità, i nuovi saggi hanno grandi possibilità di sfruttamento commerciale.
