Il dolore neuropatico e il ruolo dell'anoctamina-6
Il dolore neuropatico è il risultato della microgliosi nel midollo spinale in risposta alla lesione dei nervi periferici, che è scarsamente compresa è ha opzioni di trattamento limitate. La microgliosi è un processo di attivazione delle cellule microgliali nel midollo spinale per rimuovere i nervi sensoriali periferici danneggiati attivando contemporaneamente la sensazione di dolore. Il progetto CACCINNP ("Microglia and neuropathic pain: The role of calcium activated chloride channels"), finanziato dall'UE, ha analizzato a fondo i meccanismi molecolari coinvolti nell'attivazione delle cellule microgliali associati al dolore neuropatico. In particolare è stata studiata una proteina di membrana chiamata anoctamina-6, associata alla regolazione del trasporto di cloruro (Cl-) e all'asimmetria della membrana. I ricercatori hanno utilizzato un nuovo indicatore geneticamente codificato chiamato Sensore Cl- che presenta una mutazione genetica in grado di aumentare la sensibilità al cloruro. Sono state create due linee murine che esprimevano questo Sensore Cl- per caratterizzare in modo funzionale le modifiche di Cl- intracellulare nelle cellule nervose utilizzando strumenti raziometrici. Il ruolo dell'anoctamina-6 come canale di cloruro è stato confermato in un sistema eterologo transitoriamente transfetto con anoctamina-6 cDNA. La separazione delle cellule attivate con fluorescenza, la mutagenesi sito diretta e la microscopia time lapse sono state utilizzate per rivelare il suo ruolo nello scrambling (mescolamento) calcio dipendente di fosfolipidi quali la fosfatildilserina (PS). La disfunzione della PS è stata valutata tramite l'impiego di topi knockout (KO) condizionali per l'anoctamina-6. Nei topi si è osservata una riduzione della fagocitosi e dell'attività delle scramblasi. Le mutazioni in questi topi KO ricordavano il raro disturbo emorragico congenito chiamato sindrome di Scott osservato in alcuni pazienti. In un modello murino per il dolore neuropatico è stato osservato un aumento nella microgliosi delle cellule neuropatiche. Ulteriori studi dovrebbero continuare a chiarire il ruolo di questa proteina nel dolore neuropatico. Gli strumenti sviluppati dal progetto CACCINNP hanno permesso un monitoraggio non invasivo delle modificazioni del cloruro intracellulare. I risultati del progetto CACCINNP potrebbero fornire nuovi bersagli per la terapia del dolore neuropatico, e dare sollievo ai pazienti.
