Badanie zapalenia u danio pręgowanego
Neutrofile stanowią pierwszą linię obrony naszego wrodzonego układu odpornościowego. Nasze zrozumienie mechanizmów zapalenia oraz złożonej komunikacji międzykomórkowej, warunkującej wynik zapalenia, jest ograniczone. Wiele badań nad zapaleniem korzystało z modelu danio pręgowanego. Przezroczystość ciała tego zwierzęcia oraz jego dostępność genetyczna sprawiają, że jest ono idealne do badań nad różnymi biologicznymi procesami. Transgeniczna ryba, u której zachodzi ekspresja białek fluorescencyjnych w białych krwinkach, umożliwia badanie ilościowe odpowiedzi zapalnej w czasie rzeczywistym. Naukowcy z finansowanego przez UE projektu "Regulation of inflammation" (INFLAM) stworzyli nowatorskie oznaczenie zranieniowe do badania zdarzeń prowadzących do zapalenia u danio pręgowanego. To oznaczenie bazuje na chemicznym zranieniu z użyciem różnych związków, z następującą po nim wizualizacją mikroskopową, aby ocenić efekt w postaci rekrutacji i aktywności leukocytów, jak również wynik zapalenia. Badanie przesiewowe u danio pręgowanego umożliwiło identyfikację inhibitorów zapalenia, hamujących na przykład syntezę uniwersalnego sygnału zranienia, tlenku azotu. Dodatkowo konsorcjum rozwinęło nowatorskie metody wizualizacji pojawienia się reaktywnych form tlenu, również będących istotnymi mediatorami zapalenia. Co więcej analiza proteomiczna neutrofili przed zapaleniem i po nim doprowadziła do odkrycia 48 białek regulowanych różnicowo. Między innymi te białka były powiązane z okołoimmunologicznymi procesami, takimi jak prezentacja antygenu, chemotaksja czy sygnalizacja cytokininowa. Podsumowując, badacze z projektu INFLAM zwalidowali, a następnie ulepszyli model danio pręgowanego do celów badań immunologicznych. Poprzez rozwój zautomatyzowanych i bardziej wszechstronnych metod monitorowania zapalenia uzyskano fundamentalne dane na temat tego procesu. Tutaj można obejrzeć film dotyczący projektu.
Słowa kluczowe
Zapalenie, danio pręgowany, regulacja zapalenia, analiza proteomiczna
