Il sistema immunitario identifica i funghi patogeni
Ca è un fungo dimorfico che cresce come lievito o cellule filamentose; una delle poche specie del genere Candida che causa l’infezione candidosi nell’uomo. Le cellule immunitarie innate tollerano la colonizzazione commensale di Ca, ma combattono efficacemente l’invasione mucosale e sistemica di Ca patogeno. Le cellule immunitarie innate e i funghi interagiscono prevalentemente a livello della parete cellulare dei funghi, riconoscendo i profili molecolari associati ai patogeni (pathogen-associated molecular pattern, PAMP) tramite recettori per il riconoscimento dei profili (pattern recognition receptor, PRR). La composizione della parete cellulare delle ife (raggruppamenti di cellule fungine ramificate) di Ca virulenta è diversa da quella dei lieviti di Ca e porta a riconoscimento immunitario e segnalazione differenziali. L’obiettivo del progetto FUNGISORT (Sorting out host recognition of fungal infection), finanziato dall’UE, era studiare le interazioni dei PRR con i PAMP fungini e sviluppare nuovi strumenti per il riconoscimento dello stato patogeno. Il sortagging (transpeptidazione mediata da sortasi) è un sistema chemo-enzimatico per la marcatura sito-specifica delle proteine con piccole sonde che permettono di attaccare dei marcatori di affinità (come biotina o fluorofori). La tecnica può essere utilizzata per marcare proteine purificate o eseguire esperimenti di immunoprecipitazione con proteine espresse sulla superficie di cellule viventi. I ricercatori di FUNGISORT hanno applicato il sortagging per studiare il recettore delle lectine di tipo C DC-SIGN (dendritic cell-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing non-integrin), che svolge un ruolo importante nel riconoscimento immunitario innato di Ca. Utilizzando il sortagging il dominio di riconoscimento dei carboidrati di DC-SIGN è stato marcato a fluorescenza e utilizzato in esperimenti di microscopia confocale e saggi pull down nei macrofagi. I ricercatori hanno identificato glicoproteine secrete da Ca che interagiscono con DC-SIGN. Questi risultati indicano la necessità di studiare se queste glicoproteine potrebbero trovarsi in vivo e se hanno funzioni immunomodulatorie mediate da DC-SIGN. I risultati dello studio FUNGISORT hanno contribuito in modo significativo a comprendere il riconoscimento immunitario dell’infezione fungina. Hanno presentato anche nuove strade per lo sviluppo di strumenti diagnostici per determinare la patogenicità fungina.
